酶消化法分离培养原代肺动脉平滑肌细胞及免疫组化鉴定

• 作者: 周小兵 彭田红 曹宇辉 李严兵 王爱平 谢巍 龚邵新
• 来源期刊: 中南医学科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 酶消化法 大鼠肺动脉平滑肌细胞 免疫细胞化学 SD大鼠
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 78-81
• 页数: 4页
• 分类号: R563
• 字数: 3530字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15972/j.cnki.43-1509/r.2015.01.020

摘要

目的：建立体外胶原酶消化法分离培养大鼠肺动脉平滑肌细胞( PASMCs)及免疫鉴定的方法。方法采用I型胶原酶对PASMCs进行体外培养。在无菌环境下,分离提取雄性Sprague Dawley( SD)大鼠肺动脉主干,剥离外膜、剔除内皮细胞,经酶消化法,体外培养PASMCs。倒置相差显微镜观察PASMCs生长状态及特点；台盼兰测定细胞活力；免疫细胞染色法进行平滑肌α-肌动蛋白(α-SM actin)鉴定。结果酶消化法分离培养的PASMCs 3 d后,可见细胞贴壁呈梭形生长,6 d后生长迅速呈典型的峰-谷状生长,9 d后达90‰融合。通过形态学观察及免疫荧光染色法鉴定表明：培养的细胞为PASMCs；细胞存活率为98.5‰；原代培养8~10 d后即可传代,3-10代细胞生长迅速、细胞形态不易发生改变,可用于进行细胞实验。结论采用I型胶原酶消化法简单易行、可靠、PASMCs生长迅速、传代周期短的特点；尤为重要的是,培养的原代PASMCs可用于肺动脉高压和肺血管重构的研究工作。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王爱平	南华大学医学院应用解剖研究所	26	132	7.0	10.0
2	周小兵	南华大学医学院应用解剖研究所	58	369	12.0	16.0
3	李严兵	南华大学医学院应用解剖研究所	39	392	11.0	19.0
4	龚邵新	南华大学附属第一医院病理科	19	76	5.0	8.0
5	彭田红	南华大学医学院应用解剖研究所	67	262	8.0	11.0
6	曹宇辉	南华大学医学院应用解剖研究所	11	19	3.0	3.0
7	谢巍	南华大学医学院应用解剖研究所	22	205	7.0	14.0