生殖支原体黏附蛋白MgPa特异结合多肽的筛选与鉴定

• 作者: 曾焱华 朱有葱 游晓拢 王丽 王素果 邓湘赢
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 生殖支原体 黏附蛋白 噬菌体展示随机12肽库 特异结合多肽
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 应用技术
• 页码范围: 606-610
• 页数: 5页
• 字数: 4172字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2015.08.011

摘要

目的：利用噬菌体展示随机12肽库筛选生殖支原体黏附蛋白( MgPa)的特异结合多肽，以了解MgPa的生物学功能及其可能的致病机制。方法以纯化的重组生殖支原体黏附蛋白( rMgPa)为靶分子，对噬菌体展示随机12肽库进行3轮生物淘选，收集淘选后的噬菌体进行扩增培养，利用碘化钠法提取其单链DNA进行测序分析。用ELISA、竞争性结合试验和斑点免疫印迹试验检测阳性噬菌体与rMgPa结合的特异性。结果进行3轮生物淘选后，噬菌体克隆有明显富集。随机挑取的38个噬菌体克隆中，共出现11种不同的外源性多肽序列( P1~P11)。根据11条多肽序列中氨基酸出现的重复次数，推导出两条核心序列，即：V-H-W-D-F-R-Q-W-W-Q-P-S和D-W-S-S-W-V-H/Y-R-D-P-Q-T/S。 ELISA、竞争性结合试验和斑点免疫印迹试验的结果表明：11个代表性克隆中，有10个(P1~P10)能与rMgPa发生特异结合。结论成功筛选到了能与rMgPa发生特异结合的2条多肽，为了解MgPa的生物学功能，从而进一步了解Mg可能的致病机制提供前期实验基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾焱华	南华大学病原生物学研究所	43	157	7.0	9.0
2	邓湘赢	南华大学病原生物学研究所	2	5	2.0	2.0
3	游晓拢	南华大学病原生物学研究所	2	4	1.0	2.0
4	王丽	南华大学病原生物学研究所	3	5	2.0	2.0
5	王素果	南华大学病原生物学研究所	1	3	1.0	1.0