脑源性神经营养因子基因沉默对RPMI8226细胞表达VEGF的影响

• 作者: 孙春艳 张璐 王雅丹 胡豫 褚章波 陈蕾 黄靖
• 来源期刊: 中华血液学杂志
• 关键词: 多发性骨髓瘤 RNA干扰 脑源性神经营养因子 血管内皮生长因子A
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 403-407
• 页数: 5页
• 字数: 3884字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2015.05.011

摘要

目的 研究脑源性神经营养因子(BDNF)对多发性骨髓瘤(MM)细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的调控作用,初步探讨BDNF与MM血管新生的关系.方法 设计和构建针对人BDNF基因的siRNA表达载体,用脂质体LipofectamineTM2000介导转染,将空载体质粒pGenesil-1和重组质粒pGenesil-shRNA-BDNF分别转染MM细胞株RPMI8226细胞(分别命名为P0组、P1组).采用RT-PCR法和Western-blot法鉴定干扰后BDNF的表达;MTT法和流式细胞术检测细胞的增殖、凋亡;RT-PCR法和ELISA法检测干扰BDNF对细胞表达VEGF的影响.结果 ①成功构建了针对BDNF的siRNA真核表达载体.与未转染组(Pn组)及P0组相比,P1组BDNF mRNA水平及蛋白水平显著下调(P值均＜0.05);②P1组细胞的增殖活性(0.42±0.06)显著低于Pn组(0.56±0.06)和P0组(0.50±0.04)(P值均＜0.05);③P1组细胞的早期凋亡率[(53.84±9.95)％]明显高于Pn组[(5.23±2.46)％]和P0组[(9.10±3.46)％] (P值均＜0.01);④P1组细胞VEGF121、VEGF145和VEGF165mRNA表达水平分别为Pn组的(0.62±0.07)、(0.47±0.09)和(0.57±0.02)倍(P值均＜0.05).⑤P1组细胞VEGF的分泌水平分别为Pn组的(0.36±0.05)倍和P0组的(0.44±0.06)倍(P值均＜0.05).结论 BDNF基因沉默可促进RPMI8226细胞凋亡并抑制其增殖,下调RPMI8226细胞VEGF的表达,BDNF可能通过调控MM细胞VEGF的表达而参与MM血管新生的病理过程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙春艳	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	40	252	9.0	14.0
2	胡豫	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	154	742	14.0	21.0
3	陈蕾	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	22	47	4.0	6.0
4	王雅丹	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	24	118	6.0	10.0
5	张璐	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	23	87	6.0	9.0
6	褚章波	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	3	8	1.0	2.0
7	黄靖	香港大学深圳医院血液科	1	0	0.0	0.0