应用篮式生物反应器制备森林脑炎灭活疫苗(Vero细胞)

• 作者: 刘岩松 刘梦妮 孙宏亮 安继新 张朔 王华 纪权 邢坤鹏 邹勇
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 生物反应器 森林脑炎灭活疫苗 Vero细胞
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 1324-1326,1331
• 分类号: R373.3+1|R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨篮式生物反应器制备森林脑炎灭活疫苗(Vero细胞).方法 应用14 L篮式生物反应器,以Vero细胞作为森林脑炎病毒增殖的细胞基质,采用片状载体对Vero细胞进行高密度培养,探讨不同细胞接种浓度对生物反应器内细胞密度及病毒产量的影响.连续收获的森林脑炎病毒液经超滤浓缩、1:4 000(v/v)β-丙内酯灭活、柱层析纯化后,获得疫苗原液,按照《中国药典》三部(2010版)进行相关检测.结果 用(5～7.5)× 105个/ml细胞浓度接种Vero细胞培养森林脑炎病毒可连续收获30 d以上,平均病毒滴度为8.4 lgLD50/ml;1:4 000(v/v)β-丙内酯灭活24 h可完全灭活病毒,3批病毒浓缩液灭活验证试验均未检出残余活病毒;柱层析纯化后杂蛋白去除率可达89.56％;疫苗原液经无菌检查合格,其他各项质量指标均符合《中国药典》三部(2010版)规定.结论 应用篮式生物反应器培养Vero细胞制备了合格的森林脑炎灭活疫苗,该工艺适用于森林脑炎灭活疫苗的规模化生产.