蓝舌病毒选择性诱导肾癌细胞凋亡的研究

• 作者: 周峰 周晓光 张杰 杜贤进 王肖 董长垣
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 溶瘤病毒 蓝舌病毒 肾肿瘤
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 213-218
• 页数: 6页
• 分类号: R373
• 字数: 4963字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2015.04.006

摘要

目的：研究蓝舌病毒湖北株（ BTV?HbC3）对原代培养二倍体人肾小管上皮细胞（ RTECs）、人肾癌细胞（A498）和小鼠肾癌细胞（Renca）的感染特性，并探讨其靶向性杀伤肾癌细胞作用及其机制。方法原代培养二倍体人肾小管上皮细胞（ RTECs）并应用透射电镜方法鉴定，以1MOI BTV?HbC3感染RTECs、 A498和Renca细胞48 h后，观察光镜下细胞病变效应和扫描电镜下超微结构变化； MTT检测分别在0?001、0?01、0?1、1和10 MOI的病毒感染RTECs、 A498和Renca3种细胞48 h后的存活率；用流式细胞仪Anexin V／FITC＋PI分析1MOI BTV?HbC3感染3种细胞48 h后凋亡情况，并检测A498和Renca细胞感染后的DNA ladder条带；流式细胞仪PI单染法分析感染前后细胞周期的变化；荧光显微镜观察感染后A498和Renca细胞核和内质网的变化。结果成功培养出二倍体的原代人肾小管上皮细胞， BTV?HbC3感染细胞A498和Renca细胞48 h后均出现显著的细胞病变效应，电镜下胞浆中均出现典型的病毒颗粒；而RTECs对病毒不敏感，电镜下形态无变化，胞浆内未见病毒颗粒；10 MOI的BTV?HbC3感染RTECs、 A498和Renca细胞48 h后存活率分别为：（99?25±3?27）％、（25?69±3?50）％和（22?63±5?85）％， A498和Renca细胞与RTECs比较有显著差异（P＜0?05）；流式细胞仪检测1 MOI的BTV?HbC3感染48 h后RTECs、A498和Renca早期凋亡率分别为（2?0±0?9）％、（52?0±3?4）％、（40?0±2?4）％（P＜0?01）， A498和Renca细胞呈现典型的凋亡条带。细胞周期检测显示感染后A498和Renca细胞出现了S期阻滞，荧光显微镜观察到A498和Renca细胞核染色质固缩，边聚，内质网出现大量空泡，未感染A498及感染A498细胞内质网荧光值分别为56?396±7?658、33?497±5?836（ P＜0?01）；而感染后Renca内质网也出现空泡，未感染A498及感染A498细胞内质网荧光值分别为70?146±4?754、42?291±6?893（P＜0?01）。结论 BTV?HbC3对原代培养二倍体肾小管上皮细胞不敏感，能通过凋亡途径分别诱导 A498和 Renca死亡，证实了BTV?HbC3具有选择性抗肾癌的作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董长垣	武汉大学病毒学国家重点实验室	48	296	8.0	16.0
2	周晓光	武汉大学人民医院泌尿外科	30	93	5.0	8.0
3	张杰	武汉大学人民医院泌尿外科	283	1497	19.0	26.0
4	杜贤进	武汉大学人民医院急诊科	41	184	8.0	11.0
5	王肖	武汉大学人民医院泌尿外科	10	24	2.0	4.0
6	周峰	武汉大学人民医院泌尿外科	31	60	4.0	6.0