烟草原生质体制备体系的优化及PVYN导入研究

• 作者: 吴元华 安梦楠 李晓冬 苏燕妮 董雪
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草 原生质体制备 马铃薯Y病毒N株系 侵染
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 26-30
• 页数: 5页
• 分类号: S572
• 字数: 3615字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2015.01.005

摘要

植物原生质体是除去细胞壁后仍具有活力的裸露单细胞,其在植物RNA病毒的复制机理研究方面具有广泛的应用.为了获得高产、高活力的烟草原生质体,以烟草(Nicotiana tabacum Linn.)品种K326为材料,对原生质体制备体系中的不同细胞壁酶解液成分、酶解时间、酶解渗透压稳定剂含量、离心时间以及离心转速等因素进行优化.结果表明:在含1％纤维素酶,0.5％离析酶,0.6mol· L-1甘露醇的酶解液中,26℃慢速震荡(40r·min-1)酶解4h,700r·min-1离心3min,得到产量及活力较高的原生质体,可直接用于植物病毒的接种试验;利用聚乙二醇(PEG)融合法向获得的高活力原生质体中接种马铃薯Y病毒N株系(Potato virus Y necrosis strain,PVYN),经培养后提取总RNA,通过PVYNN特异性引物经RT-PCR扩增后检测条带明显,表明PVYN成功导入烟草原生质体并自我复制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴元华	沈阳农业大学植物保护学院	159	2074	24.0	38.0
2	安梦楠	沈阳农业大学植物保护学院	17	34	3.0	5.0
3	苏燕妮	沈阳农业大学植物保护学院	9	18	3.0	4.0
4	董雪	沈阳农业大学植物保护学院	6	8	1.0	2.0
5	李晓冬	沈阳农业大学植物保护学院	5	20	2.0	4.0