2,4-二氯苯酚羟化酶在大肠杆菌中的表达及靛蓝的生物合成

• 作者: 张瑛 徐天虹 梁谏婷 赵玉婷 陈健峰
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 工学
• 关键词: 2,4-二氯苯酚羟化酶 表达 色氨酸 靛蓝 生物合成
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 476-479
• 页数: 4页
• 分类号: TS193.2+1|Q812
• 语种: 中文

摘要

靛蓝是目前使用量最大的染料,也是具有多种药效的天然药物中的成分,生物合成法生产靛蓝具有广阔的前景.该文首次发现tfdB基因编码的2,4-二氯苯酚羟化酶具有转化色氨酸合成靛蓝的能力,为进一步研究其转化机理、优化转化工艺,作者构建了携带tfdB基因的工程菌E.coli BL21(28a-tfdB),对工程菌进行了培养和诱导表达,并进一步研究了工程菌对色氨酸的转化作用.SDS-PAGE和酶活分析结果表明,tfdB基因已成功表达(55k),表达产物可将色氨酸转化为靛蓝.对培养基、诱导条件、诱导时间等转化条件的初步研究表明,采用色氨酸培养基(0.2 g/L色氨酸,2 g/L蛋白胨,5 g/L酵母粉,10 g/L NaCl),IPTG诱导浓度0.2mmol/L,诱导16 h,靛蓝浓度可达39.16 mg/L,这为重组E.coli BL21(pET28 a/tfdB)应用于靛蓝工业化生产的后续研究奠定了基础.