淫羊藿苷促进胶原水凝胶三维立体培养成骨细胞的成熟分化

• 作者: 周建 王鸣刚 石文贵 谢艳芳 陈克明 高玉海
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 细胞外基质 淫羊藿/投药和剂量 淫羊藿甙 水凝胶 胶原 成骨细胞/药物作用 细胞,培养的
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 301-307
• 页数: 7页
• 分类号: Q233
• 字数: 5415字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2015.05.10

摘要

目的：研究淫羊藿苷对胶原水凝胶三维立体培养的新生大鼠颅骨成骨细胞（ ROB）分化和成熟的影响。方法：取新生SD 大鼠颅骨，酶消化法培养ROB，将传代1次的ROB包埋于2 mg／mL的Ⅰ型鼠尾胶原中进行三维立体培养，48 h后进行双乙酸荧光素／碘化丙啶（ FDA／PI ）细胞染色、苏木素－伊红（ HE ）染色，并用扫描电镜观察细胞生长状态。分别采用终浓度为1×10－4、1×10－5、1×10－6和1×10－7 mol／L的淫羊藿苷进行干预，培养3、6、9 d后分别检测细胞内碱性磷酸酶活性，筛选最佳药物浓度；以最佳浓度淫羊藿苷干预三维凝胶中的ROB 12、24、36、48 h后，用实时定量PCR和蛋白质印迹法分别检测骨形态发生蛋白2（ BMP－2）、Runt相关转录因子2（RUNX－2）、Osterix mRNA及其蛋白表达情况。结果：胶原水凝胶三维立体培养的ROB 采用FDA／PI染色、HE染色以及扫描电镜结构显示， ROB在胶原水凝胶中分布均匀，生长状态良好。终浓度为1×10－5、1×10－6、1×10－7 mol／L的淫羊藿苷可显著提高三维凝胶中ROB的碱性磷酸酶活性，其中以1×10－6 mol／L浓度淫羊藿苷干预后ROB 的碱性磷酸酶活性最高。 1×10－6 mol／L 淫羊藿苷能显著提高BMP－2、RUNX－2、Osterix mRNA及其蛋白表达量。结论：淫羊藿苷可显著促进三维立体培养的ROB成骨性相关因子的表达，提示淫羊藿苷对胶原水凝胶三维立体培养的ROB具有较强的促骨形成活性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王鸣刚	兰州理工大学生命科学与工程学院	50	219	8.0	12.0
2	陈克明	兰州军区兰州总医院骨科研究所	210	1887	22.0	34.0
3	周建	兰州军区兰州总医院骨科研究所	50	335	10.0	16.0
4	高玉海	兰州军区兰州总医院骨科研究所	27	71	5.0	6.0
5	谢艳芳	兰州理工大学生命科学与工程学院	2	10	2.0	2.0
6	石文贵	兰州理工大学生命科学与工程学院	1	7	1.0	1.0