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摘要:
目的 建立大鼠乳鼠颅骨成骨细胞(ROBs)的胶原水凝胶三维立体培养模型.方法 取新生SD大鼠颅骨,通过酶消化法获得成骨细胞.将传代培养的第一代(标记为P1代)ROBs与不同浓度Ⅰ型鼠尾胶原(胶原浓度为1、2、3 mg/mL)、DMEM培养液、NaOH等混合,调节混合液pH并将其置于37℃使胶原凝固成形,建立细胞的三维立体培养.ROBs立体培养3d后,普通显微镜观察细胞形态及密度,培养6d后二乙酸荧光素/碘化丙啶(FDA/PI)染色法鉴定细胞存活率;培养3 d、6 d、9 d后CCK-8检测法测定细胞活性,筛选出三维立体培养最佳胶原浓度及最佳培养体系.扫描电镜和HE染色观察最佳培养体系中ROBs细胞形态以及细胞与胶原复合物的黏附和分布情况.结果 胶原浓度为2 mg/mL培养体系,胶原成形最好、硬度最高.ROBs三维立体培养3d后,胶原浓度为1 mg/mL、2 mg/mL培养体系中细胞饱满、多呈长梭形.胶原浓度为3 mg/mL的培养体系细胞多呈圆形并固缩.胶原浓度为2 mg/mL培养体系中,细胞存活率最高(P<0.05),细胞活性强于1 mg/mL组和3 mg/mL组(P<0.05).2 mg/mL培养体系组扫描电镜结果显示细胞与胶原复合物黏附较好且细胞形态正常,HE染色结果显示细胞在胶原中分布均匀且细胞形态正常.结论 胶原浓度为2 mg/mL时,能够成功建立ROBs胶原水凝胶三维立体培养模型,该模型中胶原成形较好,硬度较高,细胞生存良好,分布均匀,能够维持正常形态及活性,适用于后期科学研究.
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文献信息
篇名 大鼠颅骨成骨细胞的胶原水凝胶三维立体培养
来源期刊 四川大学学报(医学版) 学科
关键词 成骨细胞 三维立体培养 胶原水凝胶
年,卷(期) 2016,(2) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 164-168
页数 分类号
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王鸣刚 兰州理工大学生命科学与工程学院 50 219 8.0 12.0
2 陈克明 兰州军区兰州总医院骨科研究所 210 1887 22.0 34.0
3 周建 兰州军区兰州总医院骨科研究所 50 335 10.0 16.0
4 高玉海 兰州军区兰州总医院骨科研究所 27 71 5.0 6.0
5 石文贵 兰州军区兰州总医院骨科研究所 18 69 5.0 7.0
6 谢艳芳 兰州军区兰州总医院骨科研究所 11 50 4.0 7.0
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研究主题发展历程
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成骨细胞
三维立体培养
胶原水凝胶
研究起点
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研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
四川大学学报(医学版)
双月刊
1672-173X
51-1644/R
大16开
成都市人民南路三段17号
62-72
1959
chi
出版文献量(篇)
5493
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8
总被引数(次)
35558
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