水稻 OsWRKY7基因的表达研究

• 作者: 严成其 余初浪 周洁 李冬月 李茹 杨勇 王栩鸣 程晔 陈剑平
• 来源期刊: 中国水稻科学
• 学科: 农学
• 关键词: OsWRKY7 基因 启动子 表达特性 亚细胞定位 转录活性
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 559-570
• 页数: 12页
• 分类号: Q786|S511.032
• 字数: 8687字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7216.2015.06.001

摘要

WRKY 蛋白是植物中一类重要的转录因子,不仅参与植物生长发育的调控,还参与植物对各种生物和非生物胁迫的响应.本研究从水稻日本晴中分离 OsWRKY7基因的编码序列(CDS),并克隆其启动子序列进行表达研究.首先通过实时定量 PCR 的方法检测不同组织中 OsWRKY7基因的相对表达量,结果表明,OsWRKY7在叶片中的表达水平较高,且开花期的剑叶中表达量高于7 d 苗龄的幼叶.进一步将 OsWRKY7启动子与 GUS 报告基因融合,构建了植物表达载体pOsWRKY 7-GUS ,并将此载体转化日本晴.转基因植株不同组织染色分析结果显示,该启动子在植株的主根尖、叶片、颖壳中有 GUS 活性,其中叶片上可见全叶范围分布的大量蓝色斑点,这些染色结果与实时定量 PCR 的结果一致.进一步的接菌和激素处理还显示,OsWRKY7启动子在根和叶中的表达均受水稻白叶枯病菌[Xanthomonas oryzae pv．Oryzae (Xoo )]P10生理小种侵染的诱导,同时还受外源施加的细胞分裂素和生长素诱导,而水杨酸则会抑制其在根和叶中的表达.此外,我们还将 OsWRKY7基因的 CDS 序列分别与绿色荧光蛋白和酵母 GAL4的 DNA 结合域融合,对该基因进行水稻茎原生质体亚细胞定位分析和酵母自激活检验,结果显示该基因定位于细胞核中并具有转录自激活活性.上述结果表明 OsWRKY7具有明显的转录激活因子特征,其很可能参与了水稻对白叶枯菌的防御反应以及对多种激素信号的转导过程.