水稻WRKY转录因子OsWRKY76 RNA干扰载体的构建及表达分析

• 作者: 杨瑞 王双 白薇
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻 WRKY转录因子 RNA干扰 载体构建 表达分析
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·生物技术
• 页码范围: 9-13
• 页数: 5页
• 分类号: S511.03|Q943.2
• 字数: 3268字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.20190289

摘要

为研究水稻WRKY蛋白在应对各种生物以及非生物胁迫中发挥的作用,探明OsWRKY76是否参与调控水稻系统获得抗性,明确OsWRKY在植物抗病及耐逆反应过程中的作用机理,对OsWRKY76进行了氨基酸序列分析,发现OsWRKY76具有典型的WRKY结构域,属于WRKY-GCM1锌指WRKY超家族.克隆了OsWRKY76中300 bp的cDNA片段OsWRKY76-300,并扩增GUS基因中500 bp的片段作为连接物,通过片段末端人为增加的酶切位点将上述片段与Gateway系统的入门载体pENTR L16连接,形成中间由GUS 500连接、两端是OsWRKY76-300反向重复的发夹结构的载体,利用LR反应将dsWRKY76 pENTR L16中发夹结构的插入片段分别重组到诱导型双元载体GVG-TA7002和组成型双元载体Ubi-C1300中,获得RNA干扰载体.利用农杆菌介导的转化方法将诱导型双元表达载体转化水稻,获得7个转化株系.利用实时定量RT-qPCR检测转化株系中OsWRKY76的表达量,获得了2个沉默株系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	白薇	内蒙古农业大学植物逆境生理与分子生物学自治区重点实验室	13	97	6.0	9.0
2	王双	内蒙古农业大学植物逆境生理与分子生物学自治区重点实验室	1	0	0.0	0.0