新生大鼠海马神经元的原代培养与鉴定

• 作者: 余资江 孙宝飞 康朝胜 李强明 李琳 杨丹 王恒 王清青 臧贵勇
• 来源期刊: 黔南民族医专学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞培养 海马神经元 鉴定 β-微管蛋白Ⅲ 免疫荧光
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 93-97
• 页数: 5页
• 分类号: R392-33
• 字数: 3771字
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨建立简便高效的大鼠海马神经元原代培养的纯化方法.方法:(1)离体培养新生24 h内SD乳鼠海马神经元,每天在倒置相差显微镜下进行神经元的形态学观察;(2) MTT法检测培养不同时间段神经元的活力变化,并绘制生长曲线;(3)纯化培养9d神经元利用免疫荧光染色法检测β-微管蛋白Ⅲ(β-tublinⅢ)的表达率.结果:(1)倒置相差显微镜下观察原代培养的海马神经元,刚分离种植时可见神经细胞为圆形,24h大多数细胞贴壁,3d细胞突起增大、增粗,培养5～7d神经元胞体丰满,突起交织成的网络更密集,培养14 ～ 16 d后,神经元开始退化;(2)生长曲线结果发现海马神经元体外培养经历了4个时期,即生长潜伏期、对数生长期、平台期、生长停滞期;(3)经β-tublinⅢ鉴定海马神经元纯度为(93.0％±2.5％).结论:本实验方法步骤简便,可获得纯度较高的海马神经元,为研究与海马神经元相关的疾病提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余资江		92	416	9.0	15.0
2	康朝胜		43	146	7.0	9.0
3	李强明		4	12	2.0	3.0
4	杨丹		27	146	8.0	9.0
5	孙宝飞		17	57	5.0	6.0
6	王清青		3	9	2.0	3.0
7	李琳		3	6	2.0	2.0