共表达丙性肝炎病毒结构蛋白及分泌型荧光素酶Gluc的慢病毒制备与鉴定

• 作者: 刘晓明 宋敬东 张玲 新燕 谭文杰 邓瑶
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒 HCV 结构蛋白 分泌型荧光素酶
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 简报
• 页码范围: 174-179
• 页数: 6页
• 分类号: R373.2
• 语种: 中文

摘要

旨在制备共表达丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)结构蛋白及分泌型荧光素酶Gluc慢病毒VSVpp-HCV.通过构建共表达HCV结构蛋白及分泌型荧光素酶Gluc的慢病毒表达载体pCSGluc2aCE1E2,与包膜质粒pVSVG,包装质粒pHR'CMV△8.2共转染HEK 293T的方式获取慢病毒,将慢病毒感染细胞后,对细胞上清中Gluc荧光素酶活性、细胞中HCV特异蛋白的表达等进行表达鉴定.结果表明:浓缩后获得的慢病毒浓度为1×108TU/mL,电镜负染观察到直径约为100nm带包膜的浓缩慢病毒颗粒;慢病毒VSVpp-HCV感染细胞后,细胞内HCV特异蛋白及上清中Gluc荧光素酶的表达呈平行关系.因此通过检测Gluc荧光素酶的表达水平可反映HCV结构蛋白表达水平,这为建立基于慢病毒感染的带有报告基因的HCV转基因小鼠模型提供了基础.