细胞培养密度对MCF7乳腺癌细胞integrin β4水解的影响

• 作者: 严莉莎 潘娅 王晋星一 胡晓霞 臧贵勇 董宇华 陈妮 陈腾祥 霍建云
• 来源期刊: 贵阳医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 钙离子 培养密度 整合素β4 钙激活中性蛋白酶2 肝素
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 6-9
• 页数: 4页
• 分类号: R737.9|R73-37
• 字数: 2779字
• 语种: 中文

摘要

目的:研究细胞培养密度对MCF7乳腺癌细胞integrin β4水解机制.方法:常规培养高密度和低密度MCF7乳腺癌细胞,分别给予钙离子螯合剂和肝素处理,用Western blot检测不同培养密度MCF7细胞integrinβ4的水解情况;用Fluo-3 AM作为钙离子荧光探针,激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内钙离子的分布.结果:Western blot检测结果显示,在低密度和高密度培养的MCF7细胞中,integrin β4的水解模式不同;在高浓度培养的细胞中,200 kD integrin β4片段产生增多;激光共聚焦扫描显微镜观察发现,低密度培养MCF7细胞中,钙离子的绿色荧光主要成团或颗粒状分布,而且与红色荧光有较多的重合,部分钙离子分布于细胞核内;在高密度培养的细胞中,钙离子在细胞质膜和细胞核中的定位较少;钙离子螯合剂BAPTA-AM处理可使200 kD integrin β4明显减少;10-6 mol/L的肝素能够减少MCF7细胞200 kD水解片段的增多,随着肝素浓度的增高,抑制效果有所增强;相对于BAPTA-AM,10-4mol/L肝素的抑制效应减弱.结论:高密度培养的MCF7细胞中,钙离子从钙库中释放,细胞外内流增多,激活calpain 2,导致200 kD integrinβ4水解片段增多.