一种检测近缘物种混合样品的新方法

• 作者: 梁兴国 王静 贾秀双
• 来源期刊: 中国海洋大学学报（自然科学版）
• 学科: 工学
• 关键词: 双重特异性PCR 熔点 混合样品 定量分析 物种鉴定
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 46-52
• 页数: 7页
• 分类号: TS201.6
• 字数: 5705字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16441/j.cnki.hdxb.20140083

摘要

结合双重PCR(Duplex PCR,dPCR)和扩增产物熔点的测定,建立了一种定量分析近缘物种混合样品中各物种相对含量的新方法.即针对混合样品中2种物种的DNA序列,各自设计高特异性引物,使2种物种的DNA同时进行PCR扩增而互不干扰,且扩增产物的熔点有足够的差别(＞1℃);然后进行PCR扩增并测得不同温度下PCR产物同荧光染料结合后的荧光值;该荧光值对温度进行微分所得微分曲线上会产生2个峰(在两物种各自PCR产物熔点温度处),根据这2个峰的峰高比值同其相对含量的关系,即可完成对各物种含量的定量分析.本研究以长鳍和黄鳍金枪鱼的混合样品为例,对此方法的可行性进行了验证.结果表明,2种成分的含量比与对应峰值比之间线性关系良好;当混合样品中含有10％以上长鳍金枪鱼或5％以上黄鳍金枪鱼时,能够进行较准确的定量检测,证明了本方法切实可行.这一新方法解决了在混合样品中难以准确定量物种的难题,在食品安全和基因诊断领域有广泛的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王静	中国海洋大学食品科学与工程学院	73	350	10.0	17.0
2	梁兴国	中国海洋大学食品科学与工程学院	30	82	5.0	8.0
3	贾秀双	中国海洋大学食品科学与工程学院	2	5	1.0	2.0