多聚聚合酶-1在氢醌诱导的DNA损伤应答中的作用及其机制

• 作者: 云林 凌晓璇 刘林华 唐焕文 徐永春 杜谕君 温桥生
• 来源期刊: 职业与健康
• 学科: 医学
• 关键词: 氢醌 DNA损伤修复 PARP-1 AATF TK6细胞
• 年，卷（期）: 2015,（14）
• 所属期刊栏目: 实验·监测与检验
• 页码范围: 1906-1909
• 分类号: R994.6
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨多聚聚合酶-l(PARP-1)在氢醌(hydroquinone,HQ)诱导的DNA损伤应答中的作用及其相关的调控机制.方法 以磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以10 μmol/L HQ染毒TK6细胞为处理组,分别在染毒0.5、1、2、3、4、5和6h时收集细胞,以0h为对照组,或用HQ处理PARP-1沉默细胞,运用western bloting技术检测TK6细胞中磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)、聚腺苷二磷酸核糖(PAR)以及DNA损伤应答(DDR)相关蛋白PARP-1和抗凋亡转录因子(AATF)的表达情况.结果 HQ处理TK6细胞后,γ-H2AX的含量在3h时达到高峰[(14.83±1.14)倍](P＜0.05),此后逐渐下降;AATF的含量一直上升,6h含量最高[(15.62±1.14)倍](P＜0.05).PARP-1的含量先下降后上升,3h其含量最低[(0.66±0.04)倍](P＜0.05).PAR的含量在0.5 h达高峰[(1.78±0.13)倍](P＜0.05),而后逐渐下降.PARP-1沉默细胞中,HQ处理使得PARP-1、PAR和AATF的含量分别降了77％ (P＜0.05)、64％ (P＜0.05)和68％ (P＜0.05),γ-H2AX的含量上升了165倍(P＜0.05).结论 PARP-1通过聚多聚腺苷二磷酸(ADP)核糖基化作用增强AATF稳定性参与由氢醌诱导的DNA损伤修复.