胃癌组织来源的突变型DNA聚合酶β的碱基切除修复功能

• 作者: 张成娟 董子明 赵四敏 赵国强
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 胃癌 DNA聚合酶β IPTG诱导 镍柱亲和层析 碱基切除修复
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 672-676
• 分类号: R730.2
• 语种: 中文

摘要

目的 研究胃癌组织中野生型和突变型DNA聚合酶β在DNA修复过程中的作用,为进一步探讨肿瘤的病因发病学奠定基础.方法 采用聚合酶链反应(PCR)和分子克隆技术,以野生型和突变型DNA聚合酶β基因为模板,扩增后构建pGEM-T-polβ克隆载体,经PCR筛选,亚克隆于pET28a(+)表达载体中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细菌,经诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷( IPTG)诱导表达后,通过镍柱亲和层析法纯化蛋白.设计3条单链DNA引物,退火合成含有单碱基缺失的DNA底物,与纯化蛋白共做碱基切除修复(BER)实验,最后琼脂糖凝胶电泳鉴定.结果 成功构建了pET28a(+)-polβ重组表达载体；在BER实验中,野生型DNA聚合酶β能够在DNA底物的酶切位点处将其切开,突变型DNA聚合酶β不能或部分将其切开.结论 野生型DNA聚合酶β能够修复单碱基缺失的DNA底物,而突变型DNA聚合酶β在碱基缺失修复过程中的作用丧失或减弱.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国强	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	245	807	11.0	16.0
2	董子明	郑州大学基础医学院病理生理学教研室	237	965	14.0	19.0
3	张成娟	河南省肿瘤医院病理科	4	11	2.0	3.0
7	赵四敏	郑州大学基础医学院病理生理学教研室	1	0	0.0	0.0