调控NF-κB信号通路对大鼠脑星形胶质细胞继发性死亡的影响

• 作者: 尹延庆 林亨 梁远生 莫伟 谈山峰 邹新辉 陈兵 黄梓雄 龙霄翱
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 星形胶质细胞 细胞核因子-κB 继发性死亡
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 983-988
• 页数: 6页
• 分类号: Q28
• 字数: 4476字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2015.10.003

摘要

目的 观察干预细胞核因子-κB(NF-κB)信号通路对星形胶质细胞(AST)自噬、凋亡和坏死的影响. 方法 取纯化AST分成3组:(1)空白组:加入2μL PBS液1h后,再加入2μLPBS液;(2)激活组:加入2μL PBS液1h后,再加入2μL NF-κB激活剂PMA(终浓度1μmol/L);(3)抑制组:先加入2 μL NF-κB阻断剂PDTC(终浓度20 μmol/L)预处理lh,再加入2μL PMA(终浓度1μmol/L).各组细胞分别处理1、6、12、24、48 h,应用免疫细胞化学荧光法测定NF-κB蛋白的表达,应用AnnexinV/PI染色法检测凋亡和坏死,应用Western blotting检测自噬蛋白Beclin 1表达情况. 结果 (1)随着作用时间增加,NF-κB蛋白表达量也逐渐增高,24 h时空白组、激活组及抑制组表达量分别为0.27±0.46、3.13±0.35、2.00±0.53,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)各组细胞凋亡及坏死程度也随着作用时间增加而相应增高.激活组AST凋亡程度总体高于空白组与抑制组,12、24、48 h时间点3组细胞两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05).激活组AST坏死程度总体高于空白组与抑制组,24 h、48 h时间点3组细胞两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)激活组Beclin 1蛋白各时间点均较抑制组及空白组明显增加,6h时空白组、激活组及抑制组Beclin 1蛋白表达量分别为0.17±0.01、0.59±0.03、0.51 ±0.03,两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 PMA诱发的NF-κB活化能够引起AST不同程度的凋亡、坏死及自噬进程,早期以凋亡和自噬为主,晚期以坏死为主,而PDTC能够在一定程度上抑制NF-κB通路所诱导的这些死亡进程.