单增李斯特菌P60单克隆抗体的制备及初步应用

• 作者: 刘溯 周邦信 朱学亮 殷茵 王芳 骆学农
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 单增李斯特菌 P60 单克隆抗体 鉴定 ELISA
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 527-531
• 页数: 5页
• 分类号: R378.99
• 字数: 4427字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2015.06.007

摘要

目的 制备并筛选单增李斯特菌P60特异性单克隆抗体,初步建立其快速检测方法.方法 以体外表达并纯化的李斯特菌P60蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗李斯特菌P60的McAb,鉴定其抗体亚型,并对单抗的腹水效价、稳定性及亲和力进行分析.用纯化的单克隆抗体包被酶标板,结合生物素化处理的P60多克隆抗体,夹心ELISA筛选单增李斯特菌特异性单抗,并以重组P60为标准品,建立标准曲线.结果 获得了4株可稳定分泌P60单克隆抗体的杂交瘤细胞株.ELISA检测表明,筛选的6C2单克隆抗体株可特异性与单增李斯特菌(4b)P60反应.结论 建立的夹心ELISA方法可对单增李斯特菌进行特异性鉴别和定量检测.