鸦胆子素D对HPV16感染细胞株的作用及其可能机制

• 作者: 潘镏镏 章圣辉 胡燕 诸海燕 郑飞云
• 来源期刊: 温州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人宫颈永生化细胞 鸦胆子素D 增殖 人乳头瘤病毒16
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 89-94
• 页数: 6页
• 分类号: R711.74
• 字数: 4974字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-9400.2015.02.003

摘要

目的：研究鸦胆子素D对高危型人类乳头瘤病毒（HPV）16感染细胞的增殖抑制作用、促凋亡作用及其可能机制。方法：以人宫颈鳞状上皮永生化细胞株（Ect1/E6E7）作为HPV16型感染的宫颈癌前病变的体外实验模型，用1、5、10、15、30μmol/L的鸦胆子素D分别体外作用于细胞24、48、72 h，用3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）法测定细胞增殖活性改变；以1、5、10μmol/L的鸦胆子素D分别体外作用于细胞24、48、72 h后，Cell cycle staining solution检测细胞生长周期变化，Hoechst 33258细胞核荧光染色法观察细胞凋亡情况，Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率。宫颈癌细胞株Caski含有完整的HPV16型E6、E7基因序列，以此作为阳性对照，通过实时荧光定量PCR技术检测两种细胞内HPV16 E6、E7基因mRNA的表达。结果：鸦胆子素D对Ect1/E6E7细胞具有明显的抑制体外增殖作用，MTT结果显示抑制作用呈时间和浓度依赖性（P＜0.05）。经1、5、10μmol/L鸦胆子素D体外作用48 h后，细胞生长周期停滞于G1期。流式细胞仪检测显示，各实验组细胞经鸦胆子素D作用48 h后，细胞凋亡率分别为（6.25±0.76）%（、20.21±1.32）%和（8.61±1.59）%，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。Hochest33258细胞核染色法显示细胞出现凋亡形态学改变。Real-time PCR技术检测结果显示Ect1/E6E7中HPV16 E6、E7 mRNA表达水平无明显下降，与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。而Caski中HPV16 E6、E7 mRNA表达水平下降，与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：鸦胆子素D能有效地抑制Ect1/E6E7细胞增殖，其机制可能是通过抑制HPV16 E6、E7 mRNA表达从而促进细胞凋亡。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡燕	温州医科大学附属第一医院妇科	22	111	6.0	10.0
2	潘镏镏	温州医科大学附属第二医院妇科	4	17	3.0	4.0
3	章圣辉	温州医科大学附属第一医院妇科	4	20	3.0	4.0
4	郑飞云	温州医科大学附属第一医院妇科	41	133	6.0	8.0
5	诸海燕	温州医科大学附属第一医院妇科	7	16	2.0	3.0