CD137分子在 HIV 特异性 T 淋巴细胞单克隆分选和扩增中的应用

• 作者: 李丹 李亚锋 梁华 王硕 范瑾 邵一鸣 鞠斌
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: CD137 HIV 单克隆分选 体外扩增
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 应用技术
• 页码范围: 305-309
• 页数: 5页
• 字数: 4225字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2015.04.014

摘要

目的：建立通过CD137分子对HIV特异性T淋巴细胞进行单克隆分选和体外扩增的方案，对扩增后T细胞的数量和表型进行鉴定。方法分离HIV感染者外周血单个核细胞，采用多色流式细胞染色技术，分离HIV Gag特异性CD3＋CD8＋CD137＋T细胞，单个细胞分选入96孔板，在体外加入饲养细胞和细胞因子进行培养，克隆扩增后14 d对扩增的细胞进行表型鉴定，14 d和28 d分别计算扩增倍数。结果 CD137分子在未接受抗原刺激的状态下表达量很低， Gag肽库刺激后， CD137表达升高，并且表达CD137的CD8细胞均分泌IFN-γ。体外扩增14 d可以获得106的CD8 T细胞，28 d可获得107～108的 CD8 T细胞。在 Gag 肽库刺激后可达到接近100％的活化。结论CD137可替代IFN-γ等传统的细胞因子对HIV抗原特异性T细胞进行筛选和体外扩增，扩增后的T细胞仍保持非常好的活性状态。