小黑杨PnsICE1基因启动子克隆及瞬时表达分析

• 作者: 于文喜 王艳敏 白卉 邢亚娟
• 来源期刊: 植物研究
• 学科: 农学
• 关键词: 小黑杨 PnsICE1启动子 顺式调控元件 逆境胁迫
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 77-83
• 页数: 7页
• 分类号: S792.119
• 语种: 中文
• DOI: 10.7525/j.issn.1673-5102.2015.01.013

摘要

ICE1基因是能够编码类似MYC的bHLH转录因子,在低温条件下能够特定地结合CBF3启动子中的MYC作用元件,继而诱导CBF3调控的下游基因的表达,在植物逆境胁迫应答中具有重要的功能.本研究通过PCR扩增技术从小黑杨(Populus simonii×P.nigra)基因组DNA中克隆得到1 247 bp ICE1基因启动子序列,在线预测分析发现,该段序列中含有典型的真核生物核心启动子区域,除了包含多个TATA-box、CAAT-box等基本顺式作用元件外,还存在其它反应元件,如ABRE、DOFCOREZM、MYBCORE、W-box和MYCCONSENSUSATHSE等,这些元件有的与赤霉素、脱落酸等激素相关,有些与逆境胁迫诱导相关,这表明PnslCE1基因启动子可能与逆境胁迫相关,在小黑杨抵御逆境胁迫的生理过程中具有重要功能.将克隆得到的PnsICE1启动子取代pBI121中的CaMV35S启动子,构建植物表达载体pBI121-ICEPro,由PnsICE1启动子驱动报告基因gus表达,并用农杆菌介导的瞬时侵染法转化拟南芥.对瞬时侵染后的拟南芥进行GUS染色分析.结果表明,在PnsICE1启动子的驱动下,报告基因gus在花及根部中特异表达,PnsICE1启动子具有启动活性.