人脐带间充质干细胞向神经细胞分化的实验研究

• 作者: 孔佳慧 宋建 张惟 段红涛 毕雪 王月欣 王继明 董蒙 陈松
• 来源期刊: 临床眼科杂志
• 关键词: 脐带间充质干细胞 神经干细胞 神经元 糖尿病视网膜病变
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 365-370
• 页数: 6页
• 字数: 5345字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-8422.2015.04.027

摘要

目的：研究人脐带分离的间充质干细胞（ UC-MSC）在体外分离、培养、扩增和鉴定以及向神经干细胞和神经元细胞分化的可能性，为临床治疗糖尿病视网膜病变（ DR ）神经损伤提供理论基础。方法选用足月妊娠剖宫产健康胎儿的脐带，剔除动静脉后采用贴壁法分离得到UC-MSC，选用20％FBS血清培养液进行原代培养，经传代培养、流式细胞检测后，用神经分化培养基诱导UC-MSC分别向神经干细胞和神经元细胞分化，在荧光显微镜下观察细胞形态，并以免疫荧光和RT-PCR方法进行鉴定。结果 UC-MSC呈贴壁生长，倒置显微镜可见细胞呈形态相对均一的梭形细胞，呈放射状排列生长或旋涡状生长。流式细胞检测表明这些细胞表达CD105（ SH2）、CD73（SH3）及CD90等MSC标志物；不表达CD34、CD45、CD11b和CD19。经神经干细胞分化诱导后，细胞开始聚集形成大小不等的细胞簇形成悬浮的细胞团；RT-PCR及免疫荧光检测表明，其NSE和NeuroD1阳性细胞分别达（87．3±14．7）％、（72．6±11．8）％。经神经元细胞分化诱导后，细胞呈神经元样的突起，细胞胞体饱满、折光性明显变强；RT-PCR及免疫荧光检测表明，其MAP2和NF-M阳性细胞分别达（43．1±10．3）％、（69．4±19．5）％。结论在一定的诱导条件下，UC-MSC能向神经细胞分化，可能作为DR神经损伤的细胞移植治疗来源。