高致病性人禽流感 H5 N1病毒 HA 与 M1蛋白共表达制备新型病毒样颗粒

• 作者: 刘源 宋敬东 屈建国 杨扬 蓝佳明 谭文杰 陈恒 高基民
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 禽流感病毒 H5 N1 病毒样颗粒 杆状病毒表达系统
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 疫苗学
• 页码范围: 286-291
• 页数: 6页
• 字数: 5050字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2015.04.011

摘要

目的：制备由H5N1亚型人禽流感病毒血凝素（HA）和基质蛋白1（M1）两种结构蛋白组装而成的H5亚型流感病毒样颗粒（ viruslike particles，VLPs）并检测其生物活性。方法构建同时包含 A／Indonesia／05／2005（ H5N1） HA 和 A／Anhui／01／2005（ H5N1） M1基因的重组转移载体pFBD-M1-HA，筛选获得重组杆粒（重组杆状病毒质粒） rBacmid-M1-HA后，转染Spodoptra frugiperda （Sf9）昆虫细胞，包装重组杆状病毒rBV-M1-HA；Western blot和间接免疫荧光鉴定HA和M1的表达；大量制备并纯化后，在透射电镜下观察VLPs的形态结构；血凝试验检测VLPs的生物活性。结果应用昆虫细胞-杆状病毒表达系统表达H5N1 HA和M1两种结构蛋白可以高效组装产生流感VLPs，纯化后的VLPs血凝效价为1024 HAU／50μl。结论成功利用A／Indonesia／05／2005（H5N1）来源HA和A／Anhui／01／2005（H5N1）来源M1两种结构蛋白，在杆状病毒表达系统中制备有较好生物活性的人禽流感病毒H5亚型VLPs，为下一步研究人H5亚型禽流感VLPs疫苗奠定基础。