高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作系统的构建

• 作者: 孙亚伟 张慧辉 徐彦召 杭柏林 王青 胡建和
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 CMV启动子 反向遗传学
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 794-801
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文

摘要

采用分子生物学方法改造pBluescriptⅡSK(+)载体的多克隆位点,并使其获得CMV启动子序列;在获得该病毒的全长cDNA克隆的基础上,采用酶切、连接、转化等方法将该病毒的全长cDNA置于CMV真核启动子序列的下游,获得含有CMV启动子和HP-PRRSV XX-2012株全长cDNA克隆的重组质粒pSK-CMV-XX-2012;最后,将重组质粒直接转染Marc-145宿主细胞,拯救出HP-PRRSV XX-2012株.结果显示,含有病毒全长cDNA克隆的重组质粒直接转染Marc-145后,获得拯救病毒.病毒生长特性试验结果显示,拯救病毒与亲本病毒在Marc-145细胞上具有相似的增殖特性,且拯救病毒序列含有不同于亲本病毒的分子标记(突变产生的MluⅠ酶切位点).本研究建立了一种研究HP-PRRSV反向遗传操作系统的简单、快速、节约时间和成本的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杭柏林		136	530	12.0	18.0
2	胡建和		140	452	10.0	15.0
3	张慧辉		41	162	7.0	11.0
4	王青		69	227	10.0	11.0
5	徐彦召		48	109	5.0	8.0
6	孙亚伟		24	36	4.0	4.0