胆管上皮细胞TLR3内源性活化在原发性胆汁性肝硬化炎性损伤中的作用

• 作者: 张红星 熊怀民 蒋廷旺 许国华 许晔琼
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 原发性胆汁性肝硬化 胆管上皮细胞 Toll样受体3 内源性
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 472-476
• 页数: 5页
• 分类号: R575.2
• 字数: 3647字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y150182

摘要

目的:研究内源性双链RNA活化人肝内胆管上皮细胞(human intrahepatic biliary epithelial cells,HiBEC)中Toll样受体3(Toll-like receptor 3,TLR3)引起的凋亡及其信号通路变化.方法:体外培养HiBEC,同时通过反复冻融制备坏死的HiBEC.TLR3活化组:将死亡细胞与活细胞共同培养6h;对照组:以核酸酶处理过的坏死细胞与活细胞共培养,每组设3复孔.以Annexin V/PI测定细胞凋亡率,同时以JC-1荧光探针测定细胞线粒体膜电位.荧光定量PCR法检测TLR3和β干扰素Toll样受体结构域衔接蛋白(Toll-interleukin 1 receptor domain-containing adaptor inducing interferon-β,TRIF)的表达量,同时以流式细胞术测定Caspase-3的活性.结果:TLR3活化组的HiBEC经内源性活化后,凋亡率为(33.32±2.39)％,明显高于通过RNA酶处理后的对照组[(2.83±0.53)％,P＜0.001);线粒体膜电位检测结果表明,TLR3活化组的HiBEC经内源性活化后,表达绿色荧光的细胞比例明显增加,均值为(34.75±6.54)％,明显高于RNA酶处理后的对照组[(3.21±1.24)％,P＜0.001);定量PCR分析发现TLR3活化组的TLR3和TRIF mRNA相对表达量分别为3.75 ±0.22和4.05 ±0.14,均明显高于对照组(分别为0.98 ±0.05和1.03 ±0.07,P＜0.001);流式细胞术检测结果显示,TLR3活化组细胞Caspase-3的平均表达量为(27.1±3.5)％,明显高于RNA酶处理组[(8.5±2.1)％,P＜0.001).结论:内源性双链RNA可以通过活化TLR3诱导HiBEC凋亡,可能在原发性胆汁性肝硬化的炎性损伤过程中发挥重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊怀民		13	77	6.0	8.0
2	蒋廷旺		33	107	6.0	9.0
3	许国华		10	17	3.0	3.0
4	张红星		5	29	2.0	5.0
5	许晔琼		2	2	1.0	1.0