云纹石斑鱼心脏细胞系的建立与鉴定

• 作者: 于洋 修旺珊 刘肖峰 吴娅红 沙珍霞 王娜 陈松林
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 云纹石斑鱼 细胞系 核型 增强绿色荧光蛋白(EGFP)
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 1394-1400
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.10.016

摘要

鱼类细胞系在鱼类病毒学及功能基因组学方面发挥着重要作用.云纹石斑鱼(Epinephelus moara)是一种具有重要养殖价值的海水鱼类,尚未见细胞系建立的报道.本研究以云纹石斑鱼的心脏组织为材料,建立了云纹石斑鱼心脏细胞系(epinephelus moara heart cell line,EMH).细胞系所用的培养基是在L15基本培养基中添加了HEPES(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid),抗生素,胎牛血清(fetal bovine serum,FBS),β-巯基乙醇(2-Mercaptoethanol,2-ME)和碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的完全培养液.EMH细胞己传至20多代,由成纤维样细胞和上皮样细胞组成.本研究检测了温度及FBS浓度对EMH细胞生长的影响.EMH细胞在18～30℃能正常生长,其最适生长温度为30℃,在36℃时不能正常生长.FBS浓度在10％～20％细胞均能快速生长,最适FBS浓度为15％.染色体分析表明,具有正常二倍体染色体数目(2n=48)的细胞所占的比例为62％.用脂质体法将含增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因的质粒载体pEGFP-N3转入EMH细胞后,EGFP成功表达.EMH细胞系的建立将为病毒的分离、鉴定和功能基因的研究奠定基础.