二甲基亚砜对体外培养眼组织细胞的毒性作用

• 作者: 侯江平 兰碧菲 程凌云 赵春晖
• 来源期刊: 中华实验眼科杂志
• 关键词: 二甲基亚砜 细胞毒性 眼组织细胞 药物筛选
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 216-220
• 页数: 5页
• 字数: 4966字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-0160.2015.03.006

摘要

背景 二甲基亚砜(DMSO)是常用的药物助溶剂,但DMSO体积分数较高时对细胞有毒性,可能影响对受试药物的正确评价,所以确定不同眼组织细胞对DMSO的敏感性十分重要. 目的 探讨DMSO对体外培养的多种眼组织细胞的最小毒性体积分数,为眼部药物的体外筛选提供依据. 方法 采集青紫蓝兔的视网膜色素上皮(RPE)细胞进行培养,并利用免疫组织化学法进行鉴定.分别对人视网膜色素上皮细胞株(ARPE19)、巩膜成纤维细胞(S75-Fron)、Müller细胞(MIO-M1)、人晶状体上皮细胞(HLEC)、人眼葡萄膜黑色素瘤细胞(OCM-1)、人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)进行体外培养.取160μl DMSO溶液和9.84 ml含体积分数2％胎牛血清(FBS)的RPM I1640或DMEM/F12或DMEM培养液配制体积分数分别为1.6％、1.0％、0.8％、0.4％、0.2％和0.1％ DMSO的RPMI1640、DMEM/F12和DMEM培养液,在培养的各种细胞中分别加入不同体积分数的DMSO培养液作用96 h,采用MTS法检测各组细胞的吸光度(A)值. 结果 培养的兔原代RPE细胞对细胞角蛋白(CK)和HMB45呈黄绿色荧光,细胞质和细胞核内S100阳性反应呈红色荧光.随着DMSO体积分数的增加,各细胞活性(A值)逐渐降低,随着DMSO体积分数的增加,ARPE19、S75-Fron、HLEC、OCM-1、HUVEC和原代RPE细胞活性(A值)均明显下降,差异均有统计学意义(均P＜0.05),当DMSO体积分数≥0.8％时,RPE细胞活性均明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05),但MIO-M1细胞株活性的差异无统计学意义(F=0.830,P=0.547).DMSO对ARPE19、HUVEC、HELA、HLEC、MIO-M1、OCM-1、原代RPE细胞和S75-Fron细胞最低有毒体积分数分别为0.8％、0.1％、0.8％、＞1.6％、＞1.6％、0.2％、0.2％和0.2％,HUVEC对DMSO的毒性最敏感,在0.1％ DMSO情况下即显示出毒性(P=0.02),而MIO-M1细胞在1.6％ DMSO的情况下仍未显示出毒性作用(P=0.39).HUVEC和原代RPE细胞活性随DMSO体积分数的增加而下降,S75-Fron细胞活性在DMSO体积分数为0.1％时开始下降,之后虽然DMSO体积分数增加,但细胞活性保持平稳,当DMSO体积分数增至1.6％时,S75-Fron细胞活性进一步下降,MIO-M1细胞活性在不同体积分数的DMSO组无明显变化. 结论 DMSO在体外实验中的细胞毒性随体积分数的增大而增强,在达到助溶效果的情况下应选用最小体积分数的DMSO,同时设与样品中DMSO相同体积分数的DMSO对照.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程凌云	温州医科大学眼视光学院眼科药物研究所	7	11	2.0	3.0
2	兰碧菲	温州医科大学眼视光学院眼科药物研究所	5	12	2.0	3.0
3	赵春晖	温州医科大学眼视光学院眼科药物研究所	3	10	2.0	3.0
4	侯江平	温州医科大学眼视光学院眼科药物研究所	2	8	2.0	2.0