一种新型抗体导向核酸转移系统关键组分的制备及鉴定

• 作者: 刘云 刘晓波 刘晓芬 吴强 张萃 肖笑荣
• 来源期刊: 广东药学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 葡萄球菌A蛋白(SPA) 多聚赖氨酸(PLL) IgG 核酸 基因转染
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 医学研究
• 页码范围: 372-377
• 页数: 6页
• 分类号: R392.12
• 字数: 6028字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-8783.2015.03.020

摘要

目的 制备并鉴定葡萄球菌A蛋白-多聚赖氨酸交联物(SPA-PLL交联物),以此交联物为“接头”,构建一种新型的抗体导向核酸转移系统.方法 采用SPDP化学偶联法制备SPA-PLL交联物;采用SDS-PAGE电泳法测定SPA-PLL交联物的纯度;采用酶联法或DNA凝胶阻滞实验分别测定SPA-PLL交联物与IgG或DNA片段的结合;将SPA-PLL交联物与Tfr抗体和pEGFP-C1质粒以适宜的质量比混合即可组装成Tfr抗体导向pEGFP-C1质粒转移系统;将该抗体导向的pEGFP-C1质粒转染人肝癌HepG2细胞,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达.结果 SPA-PLL交联物纯度较高,能良好地结合多种IgG抗体,同时也能较好地结合pEGFP-C1质粒、中和其负电荷;Tfr抗体导向pEGFP-C1质粒转移系统能特异性地转染HepG2细胞,并使pEGFP-C1质粒在细胞中有效表达.结论 SPA-PLL交联物能与核酸片段和IgG抗体非共价结合,并具有良好通用性;以此制备抗体导向核酸转移系统的过程简单方便.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴强	广东药学院基础学院	7	21	3.0	4.0
2	刘云	川北医学院基础医学院	65	202	7.0	11.0
3	张萃	广东药学院基础学院	36	175	7.0	11.0
4	刘晓波	广东药学院基础学院	11	25	4.0	4.0
5	肖笑荣	广东药学院基础学院	2	4	1.0	2.0
6	刘晓芬	广东药学院基础学院	2	7	2.0	2.0