长链非编码RNA HOTAIR对人胶质瘤细胞代谢和生长的影响

• 作者: 俞天赋 尤永平 张军霞 张雅旋 李文涛 李海林 胡奇 韩东风 魏文金
• 来源期刊: 中华神经外科杂志
• 关键词: 神经胶质瘤 线粒体 代谢 糖酵解 增殖 长链非编码RNA HOX转录反义RNA
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 942-947
• 页数: 6页
• 字数: 5206字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-2346.2015.09.021

摘要

目的 探讨长链非编码RNA HOX转录反义RNA (HOX transcript antisense RNA,HOTAIR)对人脑胶质瘤细胞代谢和生长的影响.方法 采用荧光标记的小干扰HOTAIR (si-HOTAIR)转染胶质瘤U87和U251细胞株,通过实时定量荧光聚合酶链式反应(RT-PCR)检测HOTAIR在胶质瘤细胞中的表达水平;利用CCK8实验和克隆形成实验检测细胞的生长变化;采用海马生物公司糖酵解应激实验和线粒体应激实验试剂盒检测细胞有氧糖酵解和线粒体功能.通过Western blot检测有氧糖酵解相关酶[包括葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)、丙酮酸激酶M2(PKM2)及乳酸脱氢酶A(LDHA)]的表达水平.结果 荧光显微镜下观察U87和U251细胞中si-HOTAIR转染效率均＞90％.与阴性对照(NC)组比较,si-HOTAIR组细胞中HOTAIR的表达均明显下调(P＜0.01);si-HOTAIR组U87和U251胶质瘤细胞的增殖能力和克隆形成能力明显低于NC组(P＜0.01);下调HOTAIR后,胶质瘤细胞有氧糖酵解能力减弱,表现为基础糖酵解水平降低(P＜0.05)、最大糖酵解能力减弱(P＜0.01)及糖酵解剩储备量下降(P＜0.01);si-HOTAIR组GPI、PKM2和LDHA表达水平较NC组降低(P＜0.01).下调HOTAIR后,胶质瘤细胞线粒体功能受损,与NC组比较,表现为基础呼吸水平下降(其中U87细胞P＜0.01)、线粒体偶联效率降低及剩余呼吸能力减弱(U87和U251组均P＜0.05).结论 下调HOTAIR表达可以使人胶质瘤细胞糖酵解能力和线粒体功能受损,同时影响胶质瘤细胞的生长能力.