转基因猪细胞中 CMV 启动子区域甲基化的研究

• 作者: 丛佩清 任广彩 何祖勇 张英 陈瑶生
• 来源期刊: 中山大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 甲基化 启动子 CpG岛 转基因猪
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 页码范围: 14-18
• 页数: 5页
• 分类号: S828|Q78
• 字数: 3754字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13471/j.cnki.acta.snus.2015.06.003

摘要

为研究转基因猪外源基因表达与启动子区域甲基化的关系，利用流式细胞仪检测体外传代至第5、10和15代的转基因猪成纤维细胞中EGFP荧光强度的变化情况；采用亚硫酸盐测序的方法对这3代细胞CMV IE启动子区域30个CpG岛的甲基化程度进行测定。结果显示细胞从第5代培养到第10代时荧光变弱，但是当继续培养到15代时EGFP荧光又渐渐变强，但EGFP阳性细胞的比例没有发生变化，均为100％。第5、10、15代细胞启动子区域的CpG岛甲基化阳性率分别为3．64％±1．25、2．97％±1．03和1．65％±0．74，统计结果表明3代细胞间的甲基化阳性率差异不显著（ P＞0．05）。表明转基猪成纤维细胞中CMV启动子区域的甲基化程度随着体外培养时间的变化不明显，与EGFP的表达水平变化无明显相关。