胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对牦牛卵丘细胞热休克蛋白70(HSP70)表达的影响及其与细胞凋亡的关联性分析

• 作者: 余四九 崔燕 李谷月 樊江峰 潘阳阳
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 胰岛素样生长因子(IGF-1) 牦牛 卵丘细胞 热休克蛋白70(HSP70) 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 专题:牦牛生殖调控与发育免疫
• 页码范围: 1207-1216
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.09.010

摘要

为研究胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF-1)是否通过调控热休克蛋白70 (heat shock protein 70,HSP70)抑制牦牛(Bos grunniens)卵丘细胞凋亡,本研究在牦牛卵丘细胞体外培养时分别加入0、50、100和200 ng/mL IGF-1,运用实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blot,WB)和免疫荧光技术从基因和蛋白水平检测HSP70的表达;qRT-PCR分析IGF-1对凋亡相关基因B-细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)和B细胞淋巴瘤/白血病基因伴随蛋白x(B-cell lymphoma/leukemia associated x protein,Bax)的调节作用,流式细胞技术统计不同处理组卵丘细胞凋亡率.结果显示,(1) IGF-1浓度为100 ng/mL时,卵丘细胞的HSP70 mRNA和蛋白相对表达量最高,显著高于IGF-1浓度为50和200 ng/mL组(P＜0.05),对照组HSP70 mRNA的相对表达量最低(P＜0.05),卵丘细胞的细胞质和细胞核均可表达HSP70蛋白;(2)加入IGF-1,Bax mRNA相对表达量显著下降(P＜0.05),1 00 ng/mL时最低,Bcl-2 mRNA相对表达量显著增加,100 ng/mL时最高;(3)卵丘细胞的凋亡率在100 ng/mL IGF-1最低,仅为(6.32±0.84)％,其他处理组凋亡率均显著增加(P＜0.05),对照组凋亡率最高,为(26.14±3.16)％.上述结果表明,IGF-1可调节卵丘细胞的HSP70、Bax和Bcl-2表达,降低细胞凋亡率,其最佳作用浓度为1 00 ng/mL.本研究为阐明IGF-1抑制细胞凋亡的分子机制提供了新的依据,为进一步揭示IGF-1在卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中的作用机制提供理论依据,有助于牦牛胚胎体外发育技术改进.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余四九	甘肃农业大学动物医学院	165	736	11.0	19.0
2	樊江峰	甘肃农业大学动物医学院	32	116	7.0	9.0
3	崔燕	甘肃农业大学动物医学院	119	412	10.0	13.0
4	李谷月	甘肃农业大学动物医学院	7	27	3.0	5.0
5	潘阳阳	甘肃农业大学动物医学院	40	69	5.0	7.0