慢病毒介导生长分化因子15基因沉默增强胶质瘤U373细胞的化疗耐药性

• 作者: 张欢 强兆艳 曹蕾 盖克克 胡宇千 郭谦
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胶质瘤 生长分化因子15基因 慢病毒 耐药性
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 230-235
• 分类号: R739.41|R373.9|R730.53
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2015.02.016

摘要

目的:探讨慢病毒介导的生长分化因子15(growth differentiation factor 15,GDF15)基因低表达对胶质瘤U373细胞对化疗药物替尼泊苷(teniposide,VM-26)和顺铂(cisplatin,DDP)耐药性的影响及其可能的机制.方法:将靶向GDF15的GDF15-RNAi克隆入慢病毒载体GV248,构建shRNA慢病毒LV-GDF15-RNAi,用无关序列构建阴性对照慢病毒LV-RNAi,分别稳定转染U373细胞,Western blotting检测转染对细胞内GDF15表达的影响.用梯度质量浓度的VM-26(0.1、0.5、2.5和12.5μg/ml)和DDP(0.08、0.4、2和10 μg/ml)处理LV-GDF15-RNAi组和LV-RNAi组细胞48 h,MTT法、Hoechst/PI双染检测LV-GDF15-RNAi转染对U373细胞VM-26、DDP耐药性的影响,Western blotting检测LV-GDF15-RNAi转染对U373细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-xL、P53和Caspase-3表达的影响.结果:成功构建稳定低表达GDF15的U373细胞系,LV-GDF15-RNAi组细胞内GDF15表达较LV-RNAi组和野生型U373细胞显著降低(0.013±0.001 vs 0.622±0.068、0.601±0.004,均P＜0.01).VM-26和DDP在最低浓度时,LV-GDF15-RNAi组细胞存活率即显著高于LV-RNAi组[VM-26 0.1 μg/ml:(91.84±2.64)％ vs(80.71±2.66)％,P＜0.01;DDP0.08 μg/ml:(102.35±6.79)％ vs (85.10±3.69)％,P＜0.01],随药物浓度升高差异更加显著.相同浓度的VM-26或DDP处理下,LV-GDF15-RNAi组细胞凋亡数均少于LV-RNAi组;同时,LV-GDF15-RNAi组的Bcl-2和Bcl-xL的表达量比LV-RNAi组显著增多(P＜0.05或P＜0.01),Caspase-3和P53的表达量显著下降(P＜0.05或P＜0.01).结论:下调胶质瘤U373细胞中GDF15水平能够增强细胞对VM-26和DDP的耐药性,其机制可能与GDF15调控Bcl-2、Bcl-xL、P53和Caspase-3的表达有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	强兆艳	天津医科大学基础医学院药理学教研室	14	53	4.0	6.0
2	盖克克	天津医科大学基础医学院药理学教研室	3	29	3.0	3.0
3	胡宇千	天津市第四中心医院药剂科	3	11	3.0	3.0
4	张欢	天津医科大学基础医学院药理学教研室	4	33	3.0	4.0
5	郭谦	天津医科大学基础医学院药理学教研室	3	7	2.0	2.0
6	曹蕾	天津医科大学基础医学院药理学教研室	3	7	2.0	2.0