巨噬细胞Coronin-1的表达与非Mtb源性自噬相关性的实验研究

• 作者: 刘革力 周芳妮 张路渝 李黎 陈全
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 巨噬细胞 Coronin-1 自噬 雷帕霉素 环孢素A 结核分枝杆菌
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 613-619
• 页数: 7页
• 分类号: R392.12|Q954.62
• 字数: 6721字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2015.05.008

摘要

目的：研究巨噬细胞Coronin-1与非Mtb源性细胞自噬的相关性及其可能信号通路。方法：分别构建过表达Coronin-1的pEGFP-C1-Coronin-1质粒和干扰Coronin-1表达的pGenesil-1-Coronin-1质粒，通过G418加压筛选其RAW264.7细胞稳定转染株，即 Coronin-1高表达细胞株（ RAW264.7-Cor.Plus ）和 Coronin-1低表达细胞株（ RAW264.7-Cor.Minus ）。将RAW264.7-Cor.Plus组、RAW264.7组和RAW264.7-Cor.Minus组细胞分别采取完全培养基（空白处理对照）、饥饿、雷帕霉素、环孢素A等因素处理后，通过RT-PCR法检测Beclin-1的基因转录水平，Western blot法检测Coronin-1、LC3BⅡ／LC3BⅠ及Beclin-1的蛋白表达水平。结果：Coronin-1过表达质粒和siRNA质粒均构建成功，其细胞稳定筛选株具有过表达或抑制表达Coronin-1特性。①空白处理三组细胞，Western blot法检测LC3BⅡ／LC3BⅠ的比值：RAW264.7-Cor.Minus组＞RAW264.7组＞RAW264.7-Cor.Plus组；Western blot法检测Beclin-1：RAW264.7-Cor.Minus组＞RAW264.7组＞RAW264.7-Cor.Plus组；RT-PCR法检测Beclin-1转录水平，趋势同Western blot；②饥饿处理三组细胞， LC3BⅡ／LC3BⅠ的比值：RAW264.7-Cor.Minus 组＜RAW264.7组＜RAW264.7-Cor.Plus组；③雷帕霉素处理RAW264.7细胞，其Coronin-1蛋白被显著抑制；雷帕霉素和环孢素A分别处理RAW264.7-Cor.Plus细胞，其LC3BⅡ／LC3BⅠ比值明显较空白处理组高。结论：巨噬细胞Coronin-1与非Mtb源性细胞自噬具有相关性。在营养充足状态下，Coronin-1可抑制细胞自噬；在饥饿状态下，Coronin-1可促进细胞自噬。 Coronin-1对自噬的调控可能与mTOR和钙离子信号通路有关。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈全	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心基础医学院免疫学教研室	58	230	9.0	11.0
2	李黎	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心基础医学院免疫学教研室	6	7	2.0	2.0
3	周芳妮	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心基础医学院免疫学教研室	3	5	1.0	2.0
4	刘革力	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心基础医学院免疫学教研室	36	57	4.0	6.0
5	张路渝	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心基础医学院免疫学教研室	9	16	2.0	4.0