AKT抑制剂对慢粒急变期K562细胞中Wnt/β-catenin信号通路的影响及效应观察

• 作者: 冯文莉 刘张玲 刘毅 李会 胡晶 黄峥兰
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白血病,髓系,慢性,BCR-ABL阳性 β连环素 Wnt信号通路 K562细胞
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 710-715
• 分类号: R733.722
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2015.09.05

摘要

目的 探讨PI3K-AKT信号通路靶向抑制剂AKTi Ⅳ对慢性粒细胞白血病(CML)急变期细胞K562的影响及其对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用.方法 取处于对数生长期的K562细胞,分别加入0、2.5、5、10μmol/L的AKTiⅣ进行处理,采用MTT法检测其对细胞增殖的影响,甲基纤维素克隆形成实验检测细胞的克隆形成能力,Western blotting检测K562细胞中pAKT(Thr308)、pGSK-3β(Ser9)蛋白表达情况,荧光定量PCR和Western blotting检测β-catenin及其下游靶基因c-myc、cyclin D1 mRNA和蛋白表达情况.结果 AKTiⅣ作用6、10、16h后,K562细胞的增殖能力以及克隆形成能力明显受抑,且作用10h时抑制效果最好.2.5、5、10μmol/L AKTiⅣ处理K562细胞10h后,PI3K-AKT通路明显受到抑制,pAKT(Thr308)蛋白表达依次减少.5μmol/L AKTiⅣ作用K562细胞10h后,pGSK-3β(Ser9)及β-catenin蛋白表达明显减少,而β-cateninmRNA表达水平无明显改变.5μmol/L AKTiⅣ作用K562细胞10h后,β-catenin 下游靶基因c-myc、cyclin D1的mRNA和蛋白表达水平均明显降低.结论 AKTiⅣ可抑制慢粒急变期K562细胞的增殖和克隆形成能力,其机制可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路阻断细胞的生长信号转导.