沉默PIK3C2B基因的表达可抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖及侵袭

• 作者: 李保国 李常颖 李建民 王丽丽 王海涛 韦士勤
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺肿瘤 RNA,小分子干扰 1-磷脂酰肌醇-3激酶 细胞增殖 肿瘤转移
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1063-1069
• 页数: 7页
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2015.11.529

摘要

目的:研究下调磷脂酰肌醇-3激酶催化亚基2β(phosphatidylinositol-4-phosphate 3-kinase,catalytic subunit type 2 beta,PIK3C2B)基因对前列腺癌PC-3细胞体外增殖及侵袭的影响,并探讨可能的作用机制.方法:设计合成特异性针对PIK3C2B基因的2对siRNA(PIK3C2B-siRNA1和PIK3C2B-siRNA2)及阴性对照-siRNA(negative control-siRNA,NC-siRNA);采用瞬时转染法将各siRNA转入PC-3细胞;分别采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测转入PIK3C2B-siRNA后对PC-3细胞中PIK3C2B mRNA及蛋白表达的影响;采用MTT法和Transwell侵袭实验分别检测PIK3C2B基因沉默后对PC-3细胞增殖及侵袭的影响.蛋白质印迹法检测PIK3C2B基因沉默后对其下游蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,Akt)信号通路中Akt及磷酸化Akt蛋白表达的影响.结果:PIK3C2B-siRNA转染PC-3细胞后,PIK3C2B mRNA及蛋白的表达水平均明显下调,以PIK3C2B-siRNA2的干扰效果较强(P＜0.01);48和72 h时,PIK3C2B-siRNA2转染组PC-3细胞的增殖能力均明显低于空白对照组和阴性对照组(P值均＜ 0.05);PIK3C2B-siRNA2转染组PC-3细胞的侵袭能力明显低于阴性对照组及空白对照组(P值均＜0.05).PIK3C2B-siRNA2转染组PC-3细胞中总Akt蛋白的表达水平未发生变化,但磷酸化Akt蛋白的表达水平被明显下调(P＜0.05).结论:PIK3C2B可能通过激活Akt信号转导通路促进PC-3细胞的体外增殖和侵袭能力.