沉默液泡型ATP酶c亚基ATP6V0C抑制人前列腺癌细胞侵袭的分子机制

• 作者: 刘北英 刘启忱 徐晓艳 杨一峰 梅放 由江峰 裴斐 邹鹏程
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 液泡型ATP酶 ATP6V0C LASS2/TMSG1 前列腺癌 基因沉默
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 937-947
• 页数: 11页
• 分类号: R737.25
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-167X.2017.06.002

摘要

目的:采用RNA干涉技术沉默液泡型ATP酶c亚基ATP6V0C的表达,探索ATP6V0C在前列腺癌侵袭中的分子作用机制,并研究其与LASS2/TMSG1的关系.方法与结果:ATP6V0C在高转移潜能人前列腺癌细胞系(PC-3M-1 E8和PC-3M)中的表达明显高于低转移潜能人前列腺癌细胞系(PC-3M-2B4和PC-3),选择ATP6V0C表达量最高的PC-3M-1 E8细胞进行基因沉默实验,发现ATP6V0C的siRNA转染PC-3M-1 E8后,其基质金属蛋白酶2(matrix metalloprotein-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达量及MMP-2的分泌量均无明显变化,但上清液中MMP-9的活性明显减弱,与空白对照组及阴性对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05);干扰组细胞外氢离子浓度及液泡型ATPase的活性明显降低(P＜0.05);细胞划痕修复实验及transwell体外侵袭实验结果显示ATP6V0C siRNA干扰组细胞的体外迁移及侵袭能力明显减弱(P＜0.05).PC-3M-1E8细胞转染ATP6V0C siRNA后,LASS2/TMSG1的表达明显减弱(P＜0.05).免疫荧光双重染色结果显示ATP6V0C蛋白与LASS2/TMSG1共定位于胞浆和胞膜,干扰组共定位信号与对照组相比明显减弱.结论:特异性siRNA沉默ATP6 V0C能抑制人前列腺癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制与ATP6V0C沉默后抑制V-ATPase的活性,使细胞外氢离子浓度降低,抑制MMP-9的激活,从而影响细胞外基质的降解和重塑有关.靶向siRNA干扰ATP6V0C的表达后,可能通过反馈调节机制抑制LASS2/TMSG1的表达,但其具体分子机制尚待进一步研究.