肿瘤转移抑制基因LASS2/TMSG1S248A突变体通过增加ATP6V0C表达促进前列腺癌的侵袭

• 作者: 刘北英 周雨禾 张宽根 梅放 由江峰 裴斐 邵雅昆
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 前列腺癌 点突变 液泡型ATP酶 ATP6V0C LASS2/TMSG1
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 210-220
• 页数: 11页
• 分类号: R737.25
• 语种: 中文
• DOI: 10.19723/j.issn.1671-167X.2019.02.003

摘要

目的:探讨LASS2/TMSG1及其突变体在前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的分子作用机制.方法:构建表达LASS2/TMSG1全长及其4个突变体的pcDNA3真核表达载体,并稳定转染到高转移潜能前列腺癌PC-3M-1E8细胞系中;采用qPCR和Western blot法鉴定稳定转染效果,并分析不同点突变体对LASS2/TMSG1和ATP6V0C表达量的影响;采用生长曲线测定、四甲基偶氮唑蓝(MTT)掺入实验、软琼脂集落形成实验、细胞划痕修复实验、Ma-trigel穿膜侵袭实验和流式细胞术研究LASS2/TMSG1及其4个点突变体的细胞生物学功能,并通过免疫双重荧光染色分析LASS2/TMSG1不同突变体和ATP6V0C的相互作用情况.结果:qPCR和Western blot检测显示LASS2/TMSG1 S248A组较LASS2/TMSG1野生型组ATP6V0C表达增加了3倍(P＜0.05),且免疫双重荧光染色结果显示LASS2/TMSG1 S248A组ATP6V0C表达明显增加;与LASS2/TMSG1野生型组相比,LASS2/TMSG1 S248A组的细胞增殖能力、锚着不依赖生长能力、细胞迁移能力(细胞迁移率从35.3％±3.2％增加到70.3％±3％)和侵袭能力(穿膜细胞数从50.0±3.2增加到203.0±6.5)明显提高(P＜0.05),G0/G1期比例增加(从51.0％增加到85.4％,P＜0.05),但细胞凋亡率亦明显升高(从7％增加到15.1％,P＜0.05).结论:LASS2/TMSG1第248位丝氨酸突变为丙氨酸后(S248A)能促进前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,其分子机制可能是LASS2/TMSG S248A使ATP6V0C表达量增加,进而促进前列腺癌的侵袭,提示LASS2/TMSG1蛋白第248位丝氨酸是抑制前列腺癌侵袭的重要功能位点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘北英	北京科技大学机械学院	27	184	7.0	13.0
2	裴斐	北京大学基础医学院病理学系	46	443	11.0	20.0
6	由江峰	北京大学基础医学院病理学系	42	372	11.0	16.0
7	梅放	北京大学基础医学院病理学系	21	65	5.0	7.0
8	周雨禾	北京大学基础医学院病理学系	2	0	0.0	0.0
9	张宽根	北京大学基础医学院病理学系	1	0	0.0	0.0
10	邵雅昆	北京大学基础医学院病理学系	1	0	0.0	0.0