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摘要:
目的:探讨LASS2/TMSG1及其突变体在前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭中的分子作用机制.方法:构建表达LASS2/TMSG1全长及其4个突变体的pcDNA3真核表达载体,并稳定转染到高转移潜能前列腺癌PC-3M-1E8细胞系中;采用qPCR和Western blot法鉴定稳定转染效果,并分析不同点突变体对LASS2/TMSG1和ATP6V0C表达量的影响;采用生长曲线测定、四甲基偶氮唑蓝(MTT)掺入实验、软琼脂集落形成实验、细胞划痕修复实验、Ma-trigel穿膜侵袭实验和流式细胞术研究LASS2/TMSG1及其4个点突变体的细胞生物学功能,并通过免疫双重荧光染色分析LASS2/TMSG1不同突变体和ATP6V0C的相互作用情况.结果:qPCR和Western blot检测显示LASS2/TMSG1 S248A组较LASS2/TMSG1野生型组ATP6V0C表达增加了3倍(P<0.05),且免疫双重荧光染色结果显示LASS2/TMSG1 S248A组ATP6V0C表达明显增加;与LASS2/TMSG1野生型组相比,LASS2/TMSG1 S248A组的细胞增殖能力、锚着不依赖生长能力、细胞迁移能力(细胞迁移率从35.3%±3.2%增加到70.3%±3%)和侵袭能力(穿膜细胞数从50.0±3.2增加到203.0±6.5)明显提高(P<0.05),G0/G1期比例增加(从51.0%增加到85.4%,P<0.05),但细胞凋亡率亦明显升高(从7%增加到15.1%,P<0.05).结论:LASS2/TMSG1第248位丝氨酸突变为丙氨酸后(S248A)能促进前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,其分子机制可能是LASS2/TMSG S248A使ATP6V0C表达量增加,进而促进前列腺癌的侵袭,提示LASS2/TMSG1蛋白第248位丝氨酸是抑制前列腺癌侵袭的重要功能位点.
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篇名 肿瘤转移抑制基因LASS2/TMSG1S248A突变体通过增加ATP6V0C表达促进前列腺癌的侵袭
来源期刊 北京大学学报医学版 学科
关键词 前列腺癌 点突变 液泡型ATP酶 ATP6V0C LASS2/TMSG1
年,卷(期) 2019,(2) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 210-220
页数 11页 分类号 R737.25
字数 语种 中文
DOI 10.19723/j.issn.1671-167X.2019.02.003
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 刘北英 北京科技大学机械学院 27 184 7.0 13.0
2 裴斐 北京大学基础医学院病理学系 46 443 11.0 20.0
6 由江峰 北京大学基础医学院病理学系 42 372 11.0 16.0
7 梅放 北京大学基础医学院病理学系 21 65 5.0 7.0
8 周雨禾 北京大学基础医学院病理学系 2 0 0.0 0.0
9 张宽根 北京大学基础医学院病理学系 1 0 0.0 0.0
10 邵雅昆 北京大学基础医学院病理学系 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
前列腺癌
点突变
液泡型ATP酶
ATP6V0C
LASS2/TMSG1
研究起点
研究来源
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研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
北京大学学报医学版
双月刊
1671-167X
11-4691/R
大16开
1959-01-01
chi
出版文献量(篇)
3297
总下载数(次)
0
相关基金
北京市自然科学基金
英文译名:Natural Science Foundation of Beijing Province
官方网址:http://210.76.125.39/zrjjh/zrjj/
项目类型:重大项目
学科类型:
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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