苏云金芽胞杆菌FH21生物学特性及其cry1类基因的鉴定

• 作者: 何宝楠 刘荣梅 张杰 李海涛 赵世源 高继国
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 苏云金芽胞杆菌 cry1类基因 克隆 表达 杀虫活性测定
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1445-1451
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.11.006

摘要

本研究基于一株对小菜蛾(Plutella xylostella)幼虫具有高毒力的苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis菌株FH21,利用改进的限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerase chain reactionrestriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP),从FH21中成功克隆出杀虫晶体蛋白(insecticidal crystal proteins)基因cry1Bb3、cry1Da4、cryJ1Ja3和cry1Id3,GenBank登录号分别为KJ619659、KJ619660、JQ228425和KJ619661.将上述4个基因插入表达载体pEB,转化大肠杆菌(Escherichia coli)菌株Rosetta (DE3),在低温条件下经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达.FH21总蛋白与4种蛋白的表达产物采用饲喂法分别对小菜蛾、棉铃虫(Helicoverpa armigera)和亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)进行杀虫活性测定.结果表明,FH21总蛋白对3种昆虫均有较好的杀虫活性,致死中浓度(lethal concentration 50,LC50)分别为0.801、0.502和2.858 mg/L.Cry1Bb3、Cry1Ja3和Cry1Id3蛋白对小菜蛾和亚洲玉米螟有较好的杀虫活性,LC50分别为1.860、1.697、1.538、1.800、2.270和0.840 mg/L.本研究表明,Bt FH21菌株对多种农业害虫具有很高的杀虫活性,同时对其进行杀虫基因测定并对杀虫基因进行了杀虫活性测定,几种cry1类基因的发现为重要农业害虫的防治提供了更多的选择.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高继国	东北农业大学生命科学学院	81	539	12.0	19.0
2	刘荣梅	东北农业大学生命科学学院	35	251	9.0	14.0
3	赵世源	东北农业大学生命科学学院	5	14	2.0	3.0
4	何宝楠	东北农业大学生命科学学院	2	4	1.0	2.0