包载雷帕霉素的乳酸-乙醇酸共聚物纳米粒子对人脐动脉平滑肌细胞bcl-2、p27kip1表达及细胞凋亡的影响

• 作者: 刘佩毛 宋存先 尹燕平 崔永亮 张华 朱文玲 杨菁 苗立夫 陈莲凤
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 雷帕霉素 乳酸-乙醇酸共聚物 纳米粒子 细胞凋亡 人脐动脉平滑肌细胞
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 633-640
• 页数: 8页
• 分类号: R318.08|R972+.6|R331
• 语种: 中文
• DOI: 10.3881/j.issn.1000-503X.2015.06.001

摘要

目的 观察雷帕霉素(RPM)及其乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)形成的载药纳米粒子(RPM-PLGA-NPs)在不同浓度和作用时间下对离体培养人脐动脉平滑肌细胞(HUASMCs)细胞凋亡及调控基因bcl-2、p27 kip1表达的影响.方法 离体培养HUASMCs细胞并分别予不同浓度的RPM、RPM-PLGA-NPs作用12和24h,设立生理盐水及空白PLGA-NPs对照组,免疫组织化学方法检测p27kip1与bcl-2表达阳性率和表达水平的差异,采用流式细胞仪、DNA片段琼脂糖凝胶电泳及末端原位标记法检测各组HUASMCs凋亡及细胞凋亡率,噻唑蓝比色法观察不同浓度RPM和RPM-PLGA-NPs对HUASMCs存活率的影响.结果 RPM及RPM-PLGA-NPs组抑制HUASMCs增殖并呈剂量依赖关系,HUASMCs DNA电泳呈梯度条带阳性.流式细胞仪检测RPM 100 ng/ml和RPM-PLGA-NPs 500 ng/ml组的细胞凋亡百分率分别为(45.45±2.36)％和(35.04±5.64)％,显著高于对照组的(2.60±0.95)％(P＜0.01).末端原位标记法检测高剂量干预组的24h凋亡指数显著高于12h组(P＜0.05,P＜0.01).RPM 100 ng/ml组和RPM-PLGA-NPs 500 ng/ml组的p27kip1蛋白阳性表达指数(PEI)分别为(0.178±0.077)％和(0.192±0.052)％,显著高于对照组的(0.101±0.035)％ (P＜ 0.05).Spearman秩相关检验显示RPM及RPM-PLGA-NPs组凋亡指数值与p27kip1的PEI无相关性.RPM-PLGA-NPs 50 ng/ml及RPM 10 ng/ml组bcl-2的PEI分别为(6.44±1.31)％和(5.49±1.06)％,显著高于对照组的(1.84±0.47)％和(2.06±0.53)％(P＜0.05).结论 RPM及RPM-PLGA-NPs上调离体培养的HUASMCs的p27 kip1表达、促进细胞凋亡,并无下调抗细胞凋亡基因bcl-2表达的作用.相当载药量的RPM-PLGA-NPs较RPM促进血管平滑肌细胞凋亡的作用更明显,但与p27kip1表达水平无线性相关.