人 MEG3基因质粒载体的构建及其对人胰腺癌SW1990细胞增殖的影响

• 作者: 唐文 胡端敏 陈瑞东
• 来源期刊: 国际肿瘤学杂志
• 关键词: 胰腺肿瘤 RNA 基因表达调控 母源性印记基因 3
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 488-491
• 页数: 4页
• 字数: 2912字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-422X.2015.07.003

摘要

目的：构建人类母源性印记基因3（MEG3）的真核表达载体，转染得到过表达的人胰腺癌SW1990细胞株，分析 MEG3过表达对 SW1990细胞增殖的影响。方法根据 GenBank 中 MEG3的基因序列，通过化学合成的方法进行全基因合成得到人 MEG3基因全长，将其构建入 pcDNA3.0真核表达载体中，得到 pcDNA3.0-MEG3表达载体，转染胰腺癌细胞 SW1990。采用 RT-PCR 及荧光定量 PCR 技术检测转染细胞中 MEG3基因的表达量。采用 MTT 试剂盒对转染后 SW1990细胞增殖能力的变化进行检测。实验中设转染 pcDNA3.0的 SW1990细胞为阴性对照组，普通 SW1990细胞为空白对照组。结果成功构建了 MEG3真核表达质粒pcDNA3.0-MEG3，并成功转染 SW1990细胞。与两对照组相比，转染后细胞的 MEG3基因表达量显著提高，提高约895倍（F ＝73.592，P ﹤0.01）。MTT 检测结果显示，MEG3基因明显抑制 SW1990细胞的增殖，实验组72 h 时吸光度值为0.81±0.06，与阴性对照组（1.17±0.07）和空白对照组（1.08±0.03）相比，3组差异有统计学意义（ F ＝33.489，P ﹤0.01）。结论本研究成功构建了MEG3真核表达质粒 pcDNA3.0-MEG3，并证实 MEG3基因及其产物对胰腺癌 SW1990细胞增殖有明显的抑制作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐文	苏州大学附属第二医院消化内科	49	119	6.0	9.0
2	胡端敏	苏州大学附属第二医院消化内科	38	98	6.0	8.0
3	陈瑞东	苏州大学附属第二医院消化内科	5	4	1.0	1.0