正、反义Heparanase基因荧光真核表达载体的构建及胰腺癌SW1990细胞转染

• 作者: 崔明 杨彦 段体德 陈陵
• 来源期刊: 昆明医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肝素酶 荧光真核表达载体 转染
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 31-34
• 页数: 4页
• 分类号: R73-36+2
• 字数: 2742字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4706.2006.02.008

摘要

目的构建正、反义人肝素酶绿色荧光蛋白真核共表达载体,并转染人胰腺癌SW1990细胞.方法用EcoR I从pcDNA3-Hpa质粒上切下约1.7 kb的人肝素酶全长cDNA片段,然后连入pIRES2-EGFP质粒的EcoRI酶切位点上,经BamH I酶切鉴定出正义和反义表达载体,并进一步测序确认.用脂质体法将肝素酶正、反义真核表达载体转染人胰腺癌SW1990细胞,24 h后荧光倒置显微镜下检测转染结果.结果经BamH I酶切后,正义质粒形成5.3 kb和1.7 kb两条DNA片段,反义重组质粒为6.5 kb和0.5 kb两条DNA片段,与理论计算值一致; 测序结果进一步确认了方向的正确性.转染成功的胰腺癌细胞在倒置荧光显微镜下呈绿色荧光.结论成功构建了人肝素酶正、反义真核表达载体,并成功转染人胰腺癌细胞株SW1990,为进一步研究正、反义肝素酶基因转染对胰腺癌细胞的转移能力的影响奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨彦	成都军区昆明总医院普通外科	18	87	5.0	9.0
2	崔明	成都军区昆明总医院普通外科	72	343	9.0	13.0
3	段体德	昆明医学院第一附属医院普通外科	53	138	7.0	10.0
4	陈陵	第三军医大学西南医院消化专科中心	11	62	5.0	7.0