聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒载BDNF基因的制备及在活体大鼠脑内表达的实验研究

• 作者: 李昊 熊雨 胡迎春 赖雪 钟武 陈礼刚
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: PBCA纳米粒 神经营养因子 颅脑外伤
• 年，卷（期）: 2015,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 973-978
• 页数: 6页
• 分类号: Q291
• 字数: 4987字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2015.10.001

摘要

目的 制备携带脑源性神经营养因子基因(BDNF)的聚氰基丙烯酸正丁酯(PBCA)纳米粒并在活体颅脑损伤大鼠脑内表达,观察PBCA纳米粒是否具有提高BDNF基因转染率的能力. 方法 选用乳化聚合法制备PBCA纳米粒,以透射电子显微镜分析纳米粒的形态和粒径.构建真核表达载体PEGFP-BDNF,经过酶切鉴定及测序后利用PBCA纳米粒进行包裹.选用48只雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白组、PBCA组、PEGFP-BDF组、PBCA-PEGFP-BDNF组,每组12只,按照自由落体致伤原理制备颅脑损伤大鼠模型并分别注入生理盐水、PBCA纳米粒、质粒PEGFP-BDNF、PBCA-PEGP-BDNF各1 mL.7d后取大鼠右侧大脑创伤周围脑组织,经荧光显微镜,RT-PCR及Westernblotting检测BDNFmRNA及蛋白在大鼠脑组织中的表达情况. 结果 所制PBCA纳米粒粒径均匀、电动电位较高,负载率为(62.23±2.15)％.采用PBCA纳米粒包裹BDNF并转染大鼠后可见BDNF在模型大鼠脑内表达.RT-PCR结果提示,4组大鼠BDNF mRNA表达量差异有统计学意义(F=112.668,P=0.000),与前3组比较,PBCA-PEGFP-BDNF组BDNFmRNA表达量明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blotting结果提示,4组大鼠BDNF差异有统计学意义(F=66.629,P=0.000),PEGFP-BDNF组中BDNF蛋白的表达明显高于空白组和PBCA组,而PBCA-PEGFP-BDNF组中BDNF的表达明显高于前3组,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 PBCA纳米粒是一种良好的基因载体,可携带基因进入组织高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈礼刚	四川医科大学附属第一医院神经外科	6	22	3.0	4.0
2	胡迎春	四川医科大学附属第一医院急诊医学部	3	5	2.0	2.0
3	赖雪	四川医科大学附属第一医院急诊医学部	1	2	1.0	1.0
4	钟武	四川医科大学附属第一医院急诊医学部	2	7	2.0	2.0
5	李昊	四川医科大学附属第一医院神经外科	3	13	2.0	3.0
6	熊雨	四川医科大学附属第一医院神经外科	1	2	1.0	1.0