Bcl-2基因敲除对人胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响

• 作者: 刘斌 孙春亮 张海文 涂芊茜 蔡宏剑 陈海涛 魏莉
• 来源期刊: 中华胰腺病杂志
• 关键词: 胰腺肿瘤 基因,bcl-2 CRISPR-Cas9 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 237-241
• 页数: 5页
• 字数: 3218字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2015.04.005

摘要

目的 探讨Bcl-2基因对人胰腺癌SW1990细胞增殖及凋亡的影响.方法 设计并合成靶向Bcl-2基因的sgRNA(Bcl-2-sgRNA),通过CRISPR-Cas9系统将其结合到CRISPR载体Cas9,经测序验证后转染人胰腺癌细胞株SW1990,筛选Bcl-2基因敲除稳转细胞,以野生型SW1990细胞作为对照.采用CCK-8法测定细胞生长曲线,通过克隆形成实验计数细胞克隆数,运用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡.结果 成功获得Bcl-2基因敲除的人胰腺癌SW1990细胞株,其Bcl-2蛋白表达缺失.与野生SW1990细胞比较,敲除Bcl-2基因的SW1990细胞的生长被抑制,细胞克隆形成数量显著减少[(160.7±10.0)个比(285.3±14.2)个],G1期细胞比例显著增加[(84.51±0.97)％比(57.49±1.08)％],S期细胞比例显著减少[(12.82±0.99)％比(27.56±1.65)％],细胞凋亡率显著增加[(12.67±0.59)％比(0.37±0.35)％],差异均有统计学意义(P值均＜0.01).结论 敲除Bcl-2基因可抑制胰腺癌SW1990细胞的生长,降低细胞克隆形成能力,使细胞阻滞在G1期,并显著增加细胞凋亡率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘斌	解放军第401医院肿瘤科	36	334	7.0	18.0
2	魏莉	解放军第401医院肿瘤科	7	21	3.0	4.0
3	孙春亮	解放军第401医院普外科	16	132	7.0	11.0
4	张海文	解放军第401医院肿瘤科	5	5	2.0	2.0
5	陈海涛	第二军医大学长海医院老年病科	9	43	4.0	6.0
9	蔡宏剑	解放军第401医院肿瘤科	2	3	1.0	1.0
10	涂芊茜	第二军医大学长海医院老年病科	3	7	2.0	2.0