丁酸钠对Caco-2细胞增殖与凋亡的影响

• 作者: 侯龙龙 夏立广 朱利斌 李仲荣 林锦 胡书奇 黄晓忠
• 来源期刊: 中华小儿外科杂志
• 关键词: 脂肪酸类,挥发性 肠黏膜 丝裂原激活蛋白激酶类
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 新生儿坏死性小肠结肠炎专题
• 页码范围: 121-126
• 页数: 6页
• 字数: 4760字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2015.02.010

摘要

目的 观察丁酸钠及p38MAPK特异性抑制剂SB203580对Caco-2细胞的作用情况,探索短链脂肪酸损害肠上皮屏障的可能机制,进而为防治新生儿坏死性小肠结肠炎寻找新靶点提供依据.方法 使用不同浓度丁酸钠和SB203580作用于体外培养的Caco-2细胞及单层Caco-2细胞肠屏障模型,通过Cell Counting Kit(CCK-8)法检测细胞活性变化;通过Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪术与吖啶橙(Acridine Orange,AO)荧光染色检测与观察细胞凋亡情况;应用Western Blot法检测细胞内p38MAPK、p-p38MAPK的表达.结果 ①低浓度丁酸钠组(2 mmol/L)作用Caco-2细胞72 h,CCK-8的吸光度为0.78±0.049,较对照组的0.97±0.016吸光度要低(P＜0.01);②AO凋亡核染发现5 mmol/L丁酸钠作用Caco-2细胞72 h,出现典型的凋亡细胞核形态学变化;③2 mmol/L丁酸钠组作用Caco-2细胞72 h,细胞凋亡率为(14±3.21)％,与对照组的(13.77±4.92)％相比差异无统计学意义(P＞0.05);而中、高浓度丁酸钠(5 mmol/L和8mmol/L)诱导的细胞凋亡率分别为(46.96±7.28)％和(71.97±6.65)％,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01),SB203580可降低5 mmol/L丁酸钠组的凋亡率.5 mmol/L丁酸钠作用Caco-2细胞24 h后,细胞凋亡率为(9.54±3.29)％,与对照组的(9.72±2.72)％凋亡率相比差异无统计学意义(P＞0.05);作用48 h和72 h后的Caco-2细胞凋亡率分别为(26.75±3.89)％和(48.33±7.08)％,两者凋亡率均比对照组高(P＜0.01);④丁酸钠以时间和浓度依赖方式激活p38MAPK,SB203580可抑制5 mmol/L丁酸钠刺激后细胞内p-p38MAPK的表达,细胞内p38MAPK及β-Tubulin表达不受作用时间和干预药物浓度的影响.结论 中、高浓度丁酸钠通过诱导大量Caco-2细胞凋亡来破坏单层Caco-2细胞肠屏障功能,在该过程中p38MAPK可能起重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李仲荣		13	25	3.0	4.0
2	侯龙龙		3	12	2.0	3.0
3	黄晓忠		5	8	2.0	2.0
4	朱利斌		15	38	4.0	5.0
5	夏立广		4	3	1.0	1.0
6	林锦	纽约大学西奈山医学院	7	66	4.0	7.0
7	胡书奇		3	9	2.0	3.0