釉基质蛋白对大鼠脂肪源性干细胞体外成骨分化能力的实验研究

• 作者: 华咏梅 黄乐
• 来源期刊: 口腔颌面外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 釉基质蛋白 脂肪源性干细胞 细胞增殖 成骨分化
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 102-107
• 页数: 6页
• 分类号: R782.2|R318
• 字数: 4449字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4979.2015.02.004

摘要

目的：通过配制不同浓度的釉基质蛋白（enamel matrix proteins，EMPs）培养液，体外培养SD大鼠脂肪源性干细胞（adipose-derived stem cells, ADSCs），初步探究EMPs对ADSCs体外增殖活性及成骨分化能力的影响。方法：酶消化法获得大鼠脂肪间充质细胞，通过流式细胞仪技术分离、筛选干细胞，多向诱导分化对所得细胞进行鉴定；乙酸法制备EMPs干粉并通过蛋白免疫印记技术鉴定其成分，配制不同浓度的诱导液以备用；采用MTT法检测EMPs对ADSCs增殖活性的影响，并用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹的方法检测EMPs诱导ADSCs成骨分化标志物的mRNA及蛋白表达变化情况。结果：釉基质蛋白（EMPs）对大鼠脂肪源性干细胞(ADSCs)的增殖具有明显的促进作用(P<0.05)，并呈现剂量和时间依赖性； EMPs培养ADSCs 14 d后，成骨分化标志物Runx-2、Osteocalcin(OCN)、Collagen (Col-I)在mRNA和蛋白水平表达均增加，并且与EMPs成正比（P<0.05）。结论：釉基质蛋白可作为一种成骨诱导剂，能有效增强大鼠脂肪源性干细胞体外增殖活性并诱导其成骨分化。