新生大鼠胰腺干细胞的分离和培养及初步鉴定

• 作者: 张巨彪 欧阳晓晖 苏秀兰
• 来源期刊: 医学综述
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺干细胞 移植 细胞分离 细胞培养 大鼠
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 315-316,封3
• 页数: 3页
• 分类号: R617
• 字数: 2724字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2084.2015.02.047

摘要

目的 探讨分离、培养及初步鉴定新生大鼠胰腺干细胞的方法.方法 取30只无特定病原体(SPF)级新生大鼠的胰腺组织,用完整胰腺胶原酶消化法分离胰岛.以低糖改良Eagel培养液为基础培养液,于不同时期分别添加血清、碱性成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂、白血病抑制因子、神经干细胞原代培养的无血清培养液中的营养因子B27、神经元培养的无血清培养液中的营养因子N2等进行培养,倒置相差显微镜下观察其形态学特征及生长特性.应用免疫细胞化学法对培养不同时期的细胞进行巢蛋白(Nestin)及细胞角质蛋白19(CK-19)检测,并进行初步鉴定.结果 ①新生大鼠胰腺内纤维组织少,体积小,完整胰腺胶原酶消化法简化了胰岛分离步骤,减少了污染机会,有利于进一步培养.②培养24 h可见细胞贴壁,但贴壁细胞数量较少,改用无血清培养后,贴壁细胞快速生长,10～ 15 d形成单层细胞汇集,细胞形态较一致.③培养所得细胞一直较多表达胰腺干细胞的标志物Nestin,随培养时间延长,表达CK-19的细胞数量逐渐增多.结论 新生大鼠胰腺消化后,获得的细胞于不同时期表达胰腺干细胞的标志物Nestin、CK-19.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏秀兰	内蒙古医科太学中心实验室	236	1248	18.0	24.0
2	欧阳晓晖	内蒙古自治区人民医院肿瘤外科	19	58	4.0	7.0
3	张巨彪	内蒙古自治区人民医院肿瘤外科	4	41	3.0	4.0