成年大鼠胰腺导管干细胞的体外分离、培养及鉴定

• 作者: 吴英 张强 李娟 杨涛 柴怡 陈海燕
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 胰腺 导管细胞 干细胞 细胞培养
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 273-277
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.1
• 字数: 4445字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2008.03.001

摘要

目的:建立成年大鼠胰腺导管干细胞的体外分离、培养及鉴定的方法.方法:V型胶原酶溶液灌注消化成年大鼠胰腺组织,并经过Ficoll密度梯度离心去除胰岛组织,培养于含10%胎牛血清的RPMI1640培养液,而后加入表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)继续培养,7天可形成单层细胞,用0.25%胰酶-EDTA消化并传代培养.取第2代细胞利用免疫荧光染色和RT-PCR方法检测CK19、Pdx-1、Nestin、insulin及glucagon的表达.结果:经胶原酶灌注消化胰腺导管上皮,再经过Ficoll密度梯度离心去除胰岛组织,可使胰腺导管细胞得到较好的纯化.免疫荧光结果示:胰腺导管细胞CK19、Pdx-1和Nestin染色呈阳性,阳性细胞率分别为(88.6±6.2)%、(84.6±8.6)%和(79.3±10.5)%,而insulin及glucagon染色为阴性.RT-PCR结果显示该细胞表达CK19、Pdx-1和Nestin基因.结论:该方法可较好的分离出胰腺导管细胞.经鉴定该法培养所获细胞具有胰腺干细胞的特性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李娟	南京医科大学第一附属医院内分泌科	86	411	12.0	15.0
2	杨涛	南京医科大学第一附属医院内分泌科	184	800	13.0	19.0
3	陈海燕	南京医科大学第一附属医院内分泌科	14	211	6.0	14.0
4	柴怡	南京医科大学第一附属医院内分泌科	6	57	4.0	6.0
5	张强	南京医科大学第一附属医院内分泌科	11	35	3.0	5.0
6	吴英	南京医科大学第一附属医院内分泌科	6	34	2.0	5.0