益心解毒方对 NOX2亚基和 NOX4亚基过表达及小干扰 RNA 引起的心肌细胞还原型辅酶Ⅱ氧化酶活性变化的机制研究

• 作者: 付帮泽 冯玄超 王伟 解华 郭淑贞 麻春杰
• 来源期刊: 中国全科医学
• 关键词: 益心解毒方 肌细胞, 心脏 基因表达 小干扰RNA 氧化还原酶类
• 年，卷（期）: 2015,（30）
• 所属期刊栏目: 中医? 中西医结合研究
• 页码范围: 3727-3731
• 页数: 5页
• 分类号: R542.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9572.2015.30.020

摘要

目的：观察益心解毒方含药血清对NOX2、 NOX4亚基过表达和小干扰RNA （ RNAi）导致的H9C2心肌细胞还原型辅酶Ⅱ（ NADPH ）氧化酶活性的变化，探讨益心解毒方的作用机制。方法采用正常雄性Sprague－Dawley大鼠16只，构建针对NOX2、 NOX4亚基的过表达质粒和RNAi质粒。采用转染试剂瞬时转染H9C2心肌细胞，流式细胞术检测转染率，转染24 h后分组（正常H9C2细胞组、过表达组、 H9C2转阴性对照质粒组、 RNAi质粒组、益心解毒方高剂量组、益心解毒方中剂量组、益心解毒方低剂量组）给予不同剂量的含药血清干预，24 h后检测NADPH氧化酶活性。结果转染NOX2亚基过表达质粒的各组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）。其中，过表达组、益心解毒方高剂量组、益心解毒方低剂量组与正常H9C2细胞组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（P＜0.05）； H9C2转阴性对照质粒组、 RNAi质粒组、益心解毒方中剂量组与过表达组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（P＜0.05）； RNAi质粒组、益心解毒方高剂量组、益心解毒方低剂量组与H9C2转阴性对照质粒组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）；益心解毒方高剂量组、益心解毒方低剂量组与RNAi质粒组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）；益心解毒方中剂量组与益心解毒方高剂量组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）；益心解毒方低剂量组与益心解毒方中剂量组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。转染NOX4亚基过表达质粒的各组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）。其中，过表达组、益心解毒方高剂量组、益心解毒方低剂量组与正常H9C2细胞组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（P＜0.05）； H9C2转阴性对照质粒组、 RNAi质粒组、益心解毒方中剂量组、益心解毒方低剂量组与过表达组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）； RNAi质粒组、益心解毒方高剂量组、益心解毒方低剂量组与H9C2转阴性对照质粒组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）；益心解毒方高剂量组、益心解毒方低剂量组与RNAi质粒组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；益心解毒方中剂量组与益心解毒方高剂量组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）；益心解毒方低剂量组与益心解毒方中剂量组NADPH氧化酶活性比较，差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论 NOX2、 NOX4亚基的过表达可以提高NADPH氧化酶活性，而RNAi表达可以沉默NOX2、 NOX4亚基，从而降低NADPH氧化酶活性，益心解毒方不会直接影响NADPH氧化酶活性。实验研究表明干预和抑制NOX2、 NOX4亚基的NADPH氧化酶活性调控环节，降低心肌活性氧（ ROS）水平，保护心肌细胞，改善心功能，可能是益心解毒方发挥药效的重要机制。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王伟		310	3397	29.0	42.0
2	麻春杰		109	520	13.0	16.0
3	解华		23	262	10.0	16.0
4	郭淑贞		87	829	17.0	25.0
5	付帮泽		16	90	5.0	9.0
6	冯玄超		10	101	4.0	10.0