摘要:
目的 探讨氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)对成纤维细胞生长因子10(FGF-10)诱导的HaCaT细胞过度角化及增殖的作用及其机制.方法 将培养的HaCaT细胞分为4组:空白对照组(无任何处理),FGF-10组(加入FGF-10孵育24 h),ALA-PDT组(ALA孵育24 h后红光照射),FGF-10+ ALA-PDT组(FGF-10孵育24 h后,再加ALA孵育24 h,红光照射).用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,Western印迹法检测K1、K6、K16及角质形成细胞生长因子受体(KGFR)的含量,ELISA法检测各组细胞上清液中白细胞介素1α(IL-1α)蛋白表达,免疫荧光检测各组细胞KGFR和K6蛋白表达水平.统计学分析采用析因设计的方差分析和单因素方差分析.结果 析因分析显示,ALA-PDT和FGF-10对HaCaT细胞增殖无交互作用(F交互=1.369,P=0.276),FGF-10对HaCaT细胞增殖有促进作用(FFGF-10=20.853,P<0.05),而ALA-PDT有抑制作用(FALA-PDT=24.822,P< 0.05).与空白对照组细胞增殖活性(A值为0.924±0.024)比较,FGF-10组(1.233±0.099)显著升高(P<0.05),而ALA-PDT组(0.718±0.107)显著降低(P<0.05),FGF-10+ ALA-PDT组(0.901±0.014)较FGF-10组显著降低(P<0.05).Western印迹法显示,FGF-10可促进K1、K6、K16蛋白和KGFR的表达(均P<0.05),而ALA-PDT抑制这些蛋白的表达(均P< 0.05),FGF-10+ ALA-PDT组K1、K6、K16和KGFR的相对表达量与FGF-10组比较均显著降低(均P< 0.05).ELISA法显示,FGF-10会增加HaCaT细胞IL-1α蛋白分泌(P<0.05),但ALA-PDT对其没有影响(P=0.467).此外,免疫荧光检测显示,FGF-10增加HaCaT细胞K6和KGFR免疫荧光强度(P<0.05),而ALA-PDT降低K6和KGFR免疫荧光强度(P<0.05),FGF-10+ ALA-PDT组K6和KGFR免疫荧光强度显著低于FGF-10组(P<0.05).结论 ALA-PDT能抑制FGF-10诱导的HaCaT细胞过度角化及增殖,其机制与下调K1、K6、K16、KGFR及IL-1α有关.